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【求助】神经元为什么抱团??
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我用neuralbasal养神经元,第三天神经元就抱成一团一团的且连成网状突起,而不是分散成单细胞,不知道这样正常吗?如图,有人说我的细胞过密,有人说我用来包被的多聚赖氨酸有问题。关键是这样一团一团的,我无法测轴突长度啊?急求高人指点!!!
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字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2012-12-27 20:00 作者: dragonkilly 来源: 分析测试百科网
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最新回复
爱老虎游tt (2012-12-27 20:01:00)
消化液去除不彻底、或者消化液用量过大、新鲜配制的、消化时温度稍高、消化后遇有含钙镁离子的......这些也都容易造成这种现象,
爱老虎游tt (2012-12-27 20:01:23)
嗯,回想了1下,我以前做过的鸡胚、乳鼠的背根神经节培养。
1个是胶要好,对贴壁是直接影响。
2个是取材后,消化、离心、吹打要温和。
3是接触胰酶后不能用含钙镁离子的hank's液,要用D-hank's液。
普通是神经细胞传代只要后边2条9行,1般都不用再铺胶。
你的细胞里面感觉杂细胞太多、是贴壁不好吗?寻个好点的血清看看。
vcve (2012-12-27 20:01:49)
盼盼 (2012-12-27 20:05:06)
不知道你是用的反复使用的培养瓶还是一次性的那种,一次性的话一般都是用多聚赖氨酸处理过的用起来方便效果也好,如果是玻璃的培养瓶,需要自己包被赖氨酸的话建议你包被之前先用培养液浸润24h,如果清洗非常干净的话都可以不用包被多聚赖氨酸的,再一个问题就是,你消化的时间掌握的如何,如果消化时间比较短,消化不充分的话也比较容易抱团,你可以在消化液胰酶中加入一点EDTA配成终浓度为0.02%的EDTA+0.25%胰酶的混合消化液,这样效果更好,接种时不要用力吹打。
XYZQ (2012-12-27 20:05:34)
XYZQ (2012-12-27 20:06:15)
utt0989 (2012-12-27 20:06:45)
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我选的是新生的大鼠24h之内的乳鼠,但是还是出现神经元聚集的现象,镜下看感觉就是挤着长似的,特别亮,开始状态很好,到第五天就不行了,这是什么原因呢?
【求助】神经元为什么抱团??