吸附精制破伤风类毒素制造及检定规程

本品系精制破伤风类毒素经氢氧化铝吸附制成，用于预防破伤风。
1　毒素制造
制造破伤风毒素应在隔离的具有专用消毒设备的实验室内进行。实验室的墙面、地面及实验台应使用便于消毒的材料。工作人员应经过培训并接受破伤风类毒素全程免疫，以后每10年进行一次加强免疫，凡发生外伤未完全治愈前不能参加工作。
1.1　菌种
1.1.1　应选用中国药品生物制品检定所分发或同意的产毒效价高、免疫力强的破伤风菌株，必要时可对菌种进行筛选。
1.1.2菌种应定期作全面性状检查（如细菌形态、纯菌试验、糖发酵反应、产毒试验及特异性中和试验等），并有完整的传代、检定记录。
1.1.3菌种应用冻干或其他适宜方法保存在2～8℃。
1.2　培养基
制造种子管及毒素培养基所用的酪蛋白、黄豆蛋白、牛肉等蛋白质应适当加深水解。其他原材料应尽量减少对人体产生过敏反应的物质，不得含有可引起人体毒性反应的物质。培养基原材料应保证质量，所用化学原料应符合《中国生物制品主要原材料试行标准》。
1.3　毒素
1.3.1　毒素制造过程应严格控制杂菌污染，经显微镜检查或纯菌试验发现污染者应废弃。
1.3.2　毒素须经除菌过滤后方可进行下步制造程序，亦可杀菌后进行精制。
1.3.3　毒素Lf测定
用生理盐水将Lf　检定用标准破伤风抗毒素稀释至100Lf/mL，按一定间隔递增量加于一列絮状检定用试管中，每管加待检毒素1mL，摇匀后立即放入50℃水浴中，以首先出现絮状者判定毒素的Lf值，并记录絮状反应时间。
1.3.4  用于生产的毒素不得低于40Lf/mL。
2　类毒素制造
2.1　毒素或精制毒素的脱毒
毒素或精制毒素中加入适量甲醛溶液，置适宜温度进行脱毒。所用甲醛溶液等级应不低于化学纯。
2.2　脱毒试验
每瓶取样，用体重300～400g豚鼠1只，皮下注射10mL。精制毒素脱毒者可事先用生理盐水稀释成100Lf/mL，皮下注射5mL，于注射后第7、14、21天进行观察，动物不应有破伤风症状，到期每只动物体重不得较注射前减轻且健存者为合格，发生破伤风症状者应继续脱毒，体重减轻者应予重试。
2.3　脱毒试验合格的类毒素应做Lf测定。类毒素应为黄色或棕黄色透明液体。
2.4  类毒素之保存时间，自脱毒合格之日起保存于2～8℃不得超过3年。
3　精制
3.1　毒素或类毒素可用等电点沉淀、超滤、硫酸铵盐析等方法或其他适宜方法精制。
3.2　用于精制的类毒素应透明，无肉眼可见之染菌。
3.3　精制时所用化学药品等级应不低于化学纯或符合《中国药典》规定，蒸馏水应新鲜。
3.4　类毒素精制后应加0.01%(g/mL)硫柳汞防腐并尽快除菌过滤。
3.5  用同一菌种、培养基处方、精制方法制造的类毒素在同一容器内混合均匀后除菌过滤者为1批。