【求助】IgG抗体纯化的透析袋MWCO选择

字体: 小中大 | 打印发表于: 2013-4-11 15:14 作者: xueyouzhang 来源: 分析测试百科网

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【求助】IgG抗体纯化的透析袋MWCO选择

大家好！请问如果IgG混合液体中含有其他蛋白成分，如BSA，那么选择截留分子量是15KD的透析袋，能用来纯化IgG抗体吗？BSA滤的出去吗？

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最新回复

NBA (2013-4-11 15:14:18)

为什么不用亲和层析纯化抗体呢？
NBA (2013-4-11 15:14:54)

BSA肯定滤不去，BSA大概是66kD，你的15kD透析袋一点BSA也不会滤除
小荷尖尖 (2013-4-11 15:15:23)

为什么不用亲和层析纯化抗体呢？

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因为我是要做FITC标记抗体，不是做抗体纯化，而且标记的量又特别小，不太敢有凝胶柱，怕洗脱不完全，所以就想用透析袋。
我想直接标记买来的抗体，但是买的抗体都有点BSA成分，所以想把BSA滤出去，请问您可否给小弟一点指点？
cj_mondy (2013-4-11 15:16:29)

因为我是要做FITC标记抗体，不是做抗体纯化，而且标记的量又特别小，不太敢有凝胶柱，怕洗脱不完全，所以就想用透析袋。
我想直接标记买来的抗体，但是买的抗体都有点BSA成分，所以想把BSA滤出去，请问您可否给小弟一点指点？

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抗体公司卖的抗体是否添加BSA要视抗体的浓度而定，如果抗体的浓度在0.5mg/ml以上的话，就不会添加BSA，BSA只是作为一种保护剂，要去除的话除了过柱外我没有更好的方法，就算是超滤管（Millipore）100kD的截留分子量，也不能有效去除BSA
xueyouzhang (2013-4-11 15:16:58)

QUOTE:
原帖由 cj_mondy 于 2013-4-11 15:16 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
因为我是要做FITC标记抗体，不是做抗体纯化，而且标记的量又特别小，不太敢有凝胶柱，怕洗脱不完全，所以就想用透析袋。
我想直接标记买来的抗体，但是买的抗体都有点BSA成分，所以想把BSA滤出去，请问您可否给小弟一点指点？

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但是我买的抗体浓度是1mg/ml的，说明书上说里面也有BSA啊
cj_mondy (2013-4-11 15:17:36)

QUOTE:
原帖由 xueyouzhang 于 2013-4-11 15:16 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')

但是我买的抗体浓度是1mg/ml的，说明书上说里面也有BSA啊
说明书一般是说的1mg/ml，但实际浓度确不一定是这个浓度，抗体公司卖抗体一般是按抗体效价作为标准来卖的，比如1：1000倍能做WB，100ul的规格为一管，但效果是1：1000的话，浓度可能不到0.5mg/ml
NBA (2013-4-11 15:17:55)

BSA和IgG分子量差异不够大，膜分离（超滤或透析）无法有效分离。直接亲和层析分离，正确操作的收率应该不会太低。
remenb (2013-4-11 15:18:15)

如果含量不多也许不需要去，可先标记试试。此外如果有干扰为什么不选择没加BSA的呢。何况有干扰的话一般公司不应该加才是。