【求助】BL21转化长不出菌

最新回复

• BUK (2013-5-18 16:07:01)

  是不是competent cell本身就不好？

• koook5695 (2013-5-18 16:07:20)

  
  现在打算用买的BL21重新划板，挑单克隆，扩增，谢谢您！O(∩_∩)O~

• yueban-1147 (2013-5-18 16:08:58)

  
  我做转化时，一直是42度90秒

• koook5695 (2013-5-18 16:09:43)

  谢谢！可能是BL21的问题！已重买了！
  ps:为什么我的PAGE不凝呢？10%过硫酸铵是新配的，Acr-Bis配后过滤了的！TEMED加的8ul!12%的胶！为什么凝不了呢！Tris-HCL的PH也没问题！
  求助！

• S6044 (2013-5-18 16:10:01)

  
  丙烯酰胺浓度多少？

• koook5695 (2013-5-18 16:10:26)

  QUOTE:

  原帖由 S6044 于 2013-5-18 16:10 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  丙烯酰胺浓度多少？

  30%

• koook5695 (2013-5-18 16:10:49)

  
  37度放了1小时未凝，过夜以后早上来看凝了，为什么呢？

• tangxin_80 (2013-5-18 16:11:39)

  
  肯定那个 试剂有问题了，全部重新配置，试试。

• koook5695 (2013-5-18 16:12:05)

  
  过硫酸铵，丙烯酰胺都重配了，问题已解决！谢谢！

• koook5695 (2013-5-18 16:12:22)

  可是为什么浓缩胶和分离胶跑的都很慢呢？浓缩胶5%，80V电压要跑2个小时，分离胶12%，110V电压要跑6个小时

• birdfish (2013-5-18 16:12:52)

  最大问题可能是过硫酸铵或TEMED
  丙烯酰胺建议用进口的