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标题:【求助】一种蛋白，WB用不同一抗跑出来不同kD是怎么回事 ？

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发表于 2013-5-31 18:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】一种蛋白，WB用不同一抗跑出来不同kD是怎么回事 ？


我要做的蛋白叫GILZ，是一种较新的蛋白。文献里WB中针对这种蛋白的一抗大部分都是实验室自己生产的，或者别的实验室赠送的。抗体公司专门的一抗很少。此外，GILZ的基因GILZ有4种转录剪切蛋白体，分别叫GILZ1~4, NCBI GENE只能查到GILZ1和GILZ2。
各位大侠，我在Abcam网站上找到针对这种蛋白的不同一抗，但这些一抗跑出来的条带不一样大小，有的一抗目的条带是17kD左右,有的一抗是37kD, 这是为啥呢？难道不同的条带跟不同的蛋白亚型有关？


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发表于 2013-5-31 18:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

两次跑的胶好像用的是不同的marker，
你就不能用相同的marker嘛？
有些时候因为marker上样量小，跑到后来条带都看不清楚了，
排除marker不准的原因后，再找其他原因
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发表于 2013-5-31 18:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 any333 于 2013-5-31 18:02 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

两次跑的胶好像用的是不同的marker，
你就不能用相同的marker嘛？
有些时候因为marker上样量小，跑到后来条带都看不清楚了，
排除marker不准的原因后，再找其他原因 ...

我需要解释的是：上面两张图是Abcam公司网站上的图，网址见：
cuturl('http://www.abcam.com/GilZ-TilZ-antibody-ab55015.html')
cuturl('http://www.abcam.com/GilZ--TilZ-antibody-ab130301.html')
我只想弄明白一个蛋白，两种单抗为啥跑出来的条带大小不一样。、
您能为我解释么？再次感谢您~
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发表于 2013-5-31 18:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

那就要把两个抗体的资料发上来看看了
还有一点，这两条条带是在什么组织中爆出来的，是不是同一种组织？
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发表于 2013-5-31 18:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

看说明书不仔细 ，该打
看到了吧？

用抗体检测到的这个37kd的蛋白是带标签的

而17KD 的蛋白是来源于小鼠肾脏组织的，内源的，
所以正确答案是17KD


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发表于 2013-5-31 18:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
那就要把两个抗体的资料发上来看看了
还有一点，这两条条带是在什么组织中爆出来的，是不是同一种组织？

========================================================================================================

http://www.abcam.com/GilZ-TilZ-antibody-ab55015.html 37kD的一抗，单克隆，来源于小鼠

Description Mouse monoclonal to GilZ / TilZ
Host species Mouse
Tested applications IHC-P, WB, ICC/IF
Cross reactivity Reacts with
Mouse, Human, Recombinant Fragment
Immunogen Recombinant fragment:
MAQSKLDCRS PVGLDCCNCC LDLAHRSGLQ RGSSGENNNP GSPTVSNFRQ LQEKLVFENL
NTDKLNSIMR QDSLEPVLRD PCYLINEGIC NRNIDQT, corresponding to amino acids 1-98 of Human GilZ / TilZ
MAQSKLDCRSPVGLDCCNCCLDLAHRSGLQRGSSGENNNPGSPTVSNFRQLQEKLVFENLNTDKLNSIMRQDSLEPVLR DPCYLINEGICNRNIDQT


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发表于 2013-5-31 18:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
http://www.abcam.com/GilZ--TilZ-antibody-ab130301.html 17kD的一抗，多克隆，来源于兔子
Description Rabbit polyclonal to GilZ / TilZ
Host species Rabbit
Tested applications WB
Cross reactivity Reacts with Mouse, Human
Immunogen Synthetic peptide conjugated to KLH, corresponding to a region within internal sequence amino acids 61-91 of Human GilZ / TilZ (NP_004080.2, NP_001015881.1).
Positive control Mouse kidney tissue lysate


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发表于 2013-5-31 18:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
看说明书不仔细 ，该打
看到了吧？

用抗体检测到的这个37kd的蛋白是带标签的

而17KD 的蛋白是来源于小鼠肾脏组织的，内源的，
所以正确答案是17KD

=========================================================

哦 这样啊
谢谢您！ 麻烦您告诉我带标签的蛋白是怎么回事啊？正准备做WB 相关知识
我是菜鸟
太不好意思了
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