【求助】一种蛋白,WB用不同一抗跑出来不同kD是怎么回事 ?


我要做的蛋白叫GILZ,是一种较新的蛋白。文献里WB中针对这种蛋白的一抗大部分都是实验室自己生产的,或者别的实验室赠送的。抗体公司专门的一抗很少。此外,GILZ的基因GILZ有4种转录剪切蛋白体,分别叫GILZ1~4, NCBI GENE只能查到GILZ1和GILZ2。
各位大侠,我在Abcam网站上找到针对这种蛋白的不同一抗,但这些一抗跑出来的条带不一样大小,有的一抗目的条带是17kD左右,有的一抗是37kD, 这是为啥呢?难道不同的条带跟不同的蛋白亚型有关?


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最新回复

  • any333 (2013-5-31 18:02:52)


    两次跑的胶好像用的是不同的marker,
    你就不能用相同的marker嘛?
    有些时候因为marker上样量小,跑到后来条带都看不清楚了,
    排除marker不准的原因后,再找其他原因
  • 969 (2013-5-31 18:07:23)

    QUOTE:

    原帖由 any333 于 2013-5-31 18:02 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')

    两次跑的胶好像用的是不同的marker,
    你就不能用相同的marker嘛?
    有些时候因为marker上样量小,跑到后来条带都看不清楚了,
    排除marker不准的原因后,再找其他原因 ...
    我需要解释的是:上面两张图是Abcam公司网站上的图,网址见:
    cuturl('http://www.abcam.com/GilZ-TilZ-antibody-ab55015.html')
    cuturl('http://www.abcam.com/GilZ--TilZ-antibody-ab130301.html')
    我只想弄明白一个蛋白,两种单抗为啥跑出来的条带大小不一样。、
    您能为我解释么?再次感谢您~
  • 969 (2013-5-31 18:10:55)


    那就要把两个抗体的资料发上来看看了
    还有一点,这两条条带是在什么组织中爆出来的,是不是同一种组织?
  • 969 (2013-5-31 18:11:27)


    看说明书不仔细 ,该打
    看到了吧?

    用抗体检测到的这个37kd的蛋白是带标签的

    而17KD 的蛋白是来源于小鼠肾脏组织的,内源的,
    所以正确答案是17KD


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  • 68943512yao (2013-5-31 18:12:10)

    那就要把两个抗体的资料发上来看看了
    还有一点,这两条条带是在什么组织中爆出来的,是不是同一种组织?

    ========================================================================================================

    http://www.abcam.com/GilZ-TilZ-antibody-ab55015.html 37kD的一抗,单克隆,来源于小鼠

    Description Mouse monoclonal to GilZ / TilZ
    Host species Mouse
    Tested applications IHC-P, WB, ICC/IF
    Cross reactivity Reacts with
    Mouse, Human, Recombinant Fragment
    Immunogen Recombinant fragment:
    MAQSKLDCRS PVGLDCCNCC LDLAHRSGLQ RGSSGENNNP GSPTVSNFRQ LQEKLVFENL
    NTDKLNSIMR QDSLEPVLRD PCYLINEGIC NRNIDQT, corresponding to amino acids 1-98 of Human GilZ / TilZ
    MAQSKLDCRSPVGLDCCNCCLDLAHRSGLQRGSSGENNNPGSPTVSNFRQLQEKLVFENLNTDKLNSIMRQDSLEPVLR DPCYLINEGICNRNIDQT


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  • 68943512yao (2013-5-31 18:13:10)

    http://www.abcam.com/GilZ--TilZ-antibody-ab130301.html 17kD的一抗,多克隆,来源于兔子
    Description Rabbit polyclonal to GilZ / TilZ
    Host species Rabbit
    Tested applications WB
    Cross reactivity Reacts with Mouse, Human
    Immunogen Synthetic peptide conjugated to KLH, corresponding to a region within internal sequence amino acids 61-91 of Human GilZ / TilZ (NP_004080.2, NP_001015881.1).
    Positive control Mouse kidney tissue lysate


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  • 969 (2013-5-31 18:13:42)

    看说明书不仔细 ,该打
    看到了吧?

    用抗体检测到的这个37kd的蛋白是带标签的

    而17KD 的蛋白是来源于小鼠肾脏组织的,内源的,
    所以正确答案是17KD

    =========================================================

    哦 这样啊
    谢谢您! 麻烦您告诉我带标签的蛋白是怎么回事啊?正准备做WB 相关知识
    我是菜鸟
    太不好意思了