HPLC流动相溶剂的选择和缓冲液的配制-之选择

  HPLC流动相溶剂选择的一般原则:

  1. 溶剂要与使用的检测器匹配对UV-Vis,主要考虑本底吸收,下面是常用溶剂在不同波长下的吸收值: 200 205 210 215 220 230 240 250

  乙腈 0.05 0.03 0.02 0.01 0.01 <0.01

  甲醇 2.06 1.00 0.53 0.37 0.24 0.11 0.05 0.02

  THF 2.44 2.57 2.31 1.80 1.54 0.94 0.42 0.21

  醋酸1% 2.61 2.63 2.61 2.43 2.17 0.87 0.14 0.01

  磷酸0.1% <0.01

  三氟乙酸 1.20 0.78 0.54 0.34 0.20 0.06 <0.01

  三乙胺1% 2.33 2.42 2.50 2.45 2.37 1.96 0.50 0.12

  研究表明,当流动相的A>0.7的时候,基线噪声会显著增加,一般选择的吸收值<0.5。当A>1.0时,基本就不能用使了。对于示差折光检测器,主要考虑样品和流动相的折光率,这里不再赘述。

  2. 选用的溶剂粘度要低、沸点适中使用低粘度溶剂,可减小容质的传质阻力,降低柱压,利于提高柱效。从分离制备和色质连用考虑,沸点要适中,低沸点的溶剂有它的优点;但仅仅用于分析,沸点太低,反而由于溶剂的挥发,造成保留时间的变化。

  3. 尽量不用高毒性的溶剂不只是环境,单从我们自身的安全考虑,当然用低毒溶剂最好。

  4. 溶剂对样品有足够的溶解力样品如果不能溶解在选用的溶剂里,还怎么分析?不屑多解释。但如果样品在流动相里溶剂仍然不大,可以用样品的最佳溶剂先溶解,再用流动相稀释,就可以了。

  知道了上面选择溶剂的一般原则,就不难理解为什么不同乙醇、丙醇做流动相的原因了,因为它们的粘度大。

  还有丙酮,虽然粘度和毒性较低、溶解度大、极性适中,但用于它的截至吸收波长为330nm,所以不常用,如果样品的吸收大于330nm,其实用丙酮是一个不错的选择。
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最新回复

  • kcuw589 (2009-12-24 10:09:39)

    谢谢楼主分享,学习了。
  • fjdlgldg (2009-12-24 10:24:57)

    谢谢了。。。
  • 命运--ses (2009-12-24 10:26:34)

    值得关注一下。很不错!!
  • xiaoweiwe121 (2009-12-24 10:30:39)

    资料很全面。谢谢!!
  • PURPOSE人生 (2009-12-24 10:33:30)

    经验之谈!!
  • jioe5 (2009-12-24 10:36:14)

    恩,好资料!
  • sseia42 (2009-12-24 10:43:21)

    不错,关注楼主!!!!
  • iTIANMING (2009-12-24 10:54:37)

    写得很不错,值得看看!
  • 饮食男女 (2009-12-24 11:29:28)

    同意楼主观点,总结不错。。
  • woaifou (2009-12-24 11:40:23)

    支持楼主!!
  • entd_jps (2009-12-24 13:46:13)

    好东西,太感谢了。
  • maomi520 (2009-12-25 11:05:57)

    顶,楼主!!