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【求助】Protease Inhibitor Cocktail sigma 用法求助
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我买的是sigma的Protease Inhibitor Cocktail ,1ml,请问100µL的裂解液中应该加多少啊?我找了半天都没用量。请用过的朋友指点一下,谢谢!
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最新回复
00无名指00 (2013-6-08 17:23:35)
我看到过说明应该是100×母液
rxcc33 (2013-6-08 17:24:45)
我们这边也有买Sigma的PIC,不过买来的是固体,然后溶解后,都是50×分装的,我们现在买的是Roche的是片剂,它推荐的是10×的,但我一般用40×分装问题也不大.
jingling845 (2013-6-08 17:25:05)
哦,谢谢。Roche的我们也用,说明书上说1片用于10ml的提取物,将1片溶于2ml双蒸水中,那就是每ml提取物用200微升的蛋白酶抑制剂,对吗?
rxcc33 (2013-6-08 17:25:51)
阿尔茨海默病
Roche的一片工作浓度是10ml,不过说明书上推荐是配成10*的
你所说的也是对的,不过你配的是5*的,稍微太稀了点,而且你用的是DDW稀释的,太稀容易导致你的裂解液浓度下降(800ul lysis buffer+ 200ul 含水PIC使lysis buffer的效果下降,不过如果你的lysis buffer是2* SDS-loading buffer的话也就不在乎这么点浓度的变化了 ).推荐10*以上的浓度作为stock solution,至少我的40*感觉还不错
jingling845 (2013-6-08 17:26:45)
哦,明白了,的确是有点稀啊,我是想提蛋白做双向电泳,这样稀释了,一定会影响裂解效果的
plaa (2013-6-08 17:27:06)
jingling845 (2013-6-08 17:28:30)
969 (2013-6-08 17:29:36)
感觉有些乱,贴个图上来自己看吧,这是Roche的说明书中的。
BOSS2011 (2013-6-08 17:30:15)
应该是按照组织量用.即每克蛋白组织用一定量的抑制剂.
8princess8 (2013-6-08 17:30:39)
价格不是很清楚,我只知道罗氏比较强的是片剂的蛋白酶抑制剂,超好用,直接丢到裂解液里马上就溶了。sigma也有片剂,但没有EDTA-free的,而且溶解性没有罗氏的好,工作液也不能冷冻保存。从使用上看Sigma没有罗氏的好用,毕竟人家罗氏是德国的,质量还是没话说的。
jingling845 (2013-6-08 17:31:06)
100UL 细胞裂解液 加 1ul 蛋白酶抑制剂混合物 ,我想问下 你的protease inhibitor cocktail , 货号 是多少的?
谢谢
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