【求助】急问18%的Tricine-SDS-PAGE的配方？

字体: 小中大 | 打印发表于: 2013-7-09 15:47 作者: yueban-1147 来源: 分析测试百科网

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请知道的同学麻烦告诉我一下，谢谢！

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最新回复

ritou1985 (2013-7-09 15:50:13)

建议参考<Tricine-SDSP-AGE电泳分析小分子多肽>的文章
yueban-1147 (2013-7-09 15:50:36)

谢谢，可是这篇文章里面并没有我所要的１８％的ＴＲＩＣＩＮＥ－ＳＤＳ－ＰＡＧＥ的配方呢，不晓得哪能找得到呢？
windy+++ (2013-7-09 15:51:00)

18%SDS-PAGE（10ml）
H2O 1.3ml
30%ACR 6ml
1.5M Tris－HCl（pH8.8） 2.5ml
10%SDS 0.1ml
10%APS 0.1ml
TEMED 0.004ml

建议用高电压跑胶，200v左右吧！在溴酚蓝跑出后再多跑10分钟左右！
yueban-1147 (2013-7-09 15:51:24)

请问楼上,你告诉我的是用来跑小分子多肽的18%的Tricine-SDS-PAGE的配方吗？里面用到了ＴＩＳ－ＨＣＬ，可不可以用ＴＲＩＳ代替呢？那样的话配方改为多少呢？还有在你跑胶一般要花多长时间？你的上样缓冲液中用的是溴酚蓝，我用的是考马斯亮蓝，那么指示作用是不是用一些不同？谢谢！
8s5g (2013-7-09 15:52:00)

这是分离胶的配方，那基层胶的呐~~~
qianqin1977 (2013-7-09 15:53:04)

如果分离胶要配到１８％，不如改做ＴＲＩＣＩＮＥ－ＳＤＳ－ＰＡＧＥ，
我做的具体是：分离胶１６％，基层胶１０％，浓缩胶４％。效果不错。
qianqin1977 (2013-7-09 15:53:31)

这里有个tricine－SDS-PAGE配方，应该可以满足你的要求！

59680592.jpg
yueban-1147 (2013-7-09 15:53:53)

谢谢大家的回复,我想有一点我可能没说清楚,我是要跑tricine-SDS-PAGE,只是在找１８％的tricine-SDS-PAGE的配方，并不是１８％的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ的配方．还想请问一下heric,你的电泳条件是多少呀？我用的是ＢＩＯ－ＲＡＤ系统，胶只有７５ＭＭ．你有小分子量的蛋白ＭＡＲＫＥＲ吗？在哪个公司买的？售价多少呢？还有你用的上样缓冲液中的染料是溴芬兰还是考马斯亮蓝呢？
ero11 (2013-7-09 16:24:58)

我做了两个多月的ＴＲＩＣＩＮＥ了，出来的效果非常好。

（图在实验室的电脑里，明天贴上来）

用的也是ＢＩＯＲＡＤ的电泳仪，７５ＭＭ，小分子ＭＡＲＫＥＲ是１４－９７Ｋ的，售价我不太清楚，不过可以到问实验室的人员。

５Ｘ的ＬＯＡＤＩＮＧ　ＢＵＦＦＥＲ，溴汾兰。

用新配的阴极和阳极缓冲液，大约跑三小时。

我们实验室都用恒流跑，一块胶２５－３０mA,如果是两块，就用６０，电压调到最大。

在园里有时会看到战友提醒用恒压跑，不可用恒流，因为自己一直是用恒流跑的，而且效果不错，所以真有点胡涂了。
ero11 (2013-7-09 16:25:27)

法玛西亚的小分子ＭＡＲＫＥＲ，分子量从２Ｋ－１７Ｋ，你可以观注一下。
另外，贴张ＴＲＩＣＩＮＥ的电泳图。供你参考。
zranqi_1 (2013-7-09 16:26:31)

很漂亮的电泳图,能问一下什么是阴极和阳极缓冲液,他们的配方有什么不同?分别加在电泳槽的什么位置?另外除了分离胶和浓缩胶以外,基层胶又是怎么回事?怎么灌胶?问题很菜,但是还是请多多指教!
yueban-1147 (2013-7-09 16:27:58)

阴极缓冲液中多了TRICINE和SDS，阴极缓冲液加在内槽，阳极加在外槽。三层胶从下到上依次是分离胶、隔离胶和浓缩胶。
dog002 (2013-7-09 16:29:40)

这也是我想问的，分子量太小，压不成带啊。