【求助】蛋白总是遇到包涵体，怎么办？

字体: 小中大 | 打印发表于: 2013-7-22 13:42 作者: queen 来源: 分析测试百科网

查看完整版本请点击这里：
【求助】蛋白总是遇到包涵体，怎么办？

如题，我是用PET系统原核表达histag蛋白的，最近无论做什么蛋白，都是包涵体，优化了表达条件，仍然如此，郁闷啊！各位大侠帮帮我吧，谢谢！

查看完整版本请点击这里：
【求助】蛋白总是遇到包涵体，怎么办？

我也来说两句查看全部回复

最新回复

yes4 (2013-7-22 13:43:06)

楼主是在是多少温度诱导表达的？我们都是20-25度诱导。
queen (2013-7-22 13:43:33)

QUOTE:
原帖由 yes4 于 2013-7-22 13:43 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
楼主是在是多少温度诱导表达的？我们都是20-25度诱导。
16度诱导20个小时左右~
yes4 (2013-7-22 13:44:00)

QUOTE:
原帖由 queen 于 2013-7-22 13:43 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')

16度诱导20个小时左右~
这样啊，那就很奇怪了。低温诱导应该有可溶蛋白的表达啊。
toy (2013-7-22 13:44:17)

换一个表达系统试试
queen (2013-7-22 13:44:38)

QUOTE:
原帖由 toy 于 2013-7-22 13:44 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')

换一个表达系统试试
你是指换成真核表达系统吗？
viviwang1987 (2013-7-22 13:45:00)

origami试下
hold住 (2013-7-22 13:45:21)

低温诱导，或者换表达系统。
queen (2013-7-22 13:45:50)

QUOTE:
原帖由 hold住 于 2013-7-22 13:45 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')

低温诱导，或者换表达系统。
可是我已经16度诱导了，够低温了啊，是不是要换成真核表达系统呢？
koook5695 (2013-7-22 13:46:21)

我在四度冷库做过。如果你有条件，可以尝试。
tie8 (2013-7-22 13:46:55)

可以试试带氯霉素抗性的感受态试试，我师姐试过，可溶表达量明显提高了，也是pet系列的载体。
queen (2013-7-22 13:47:17)

QUOTE:
原帖由 tie8 于 2013-7-22 13:46 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')

可以试试带氯霉素抗性的感受态试试，我师姐试过，可溶表达量明显提高了，也是pet系列的载体。
谢谢啊，请问是具体什么样的感受态细胞呢？
tie8 (2013-7-22 13:47:59)

BL21(DE3)plys