【求助】免疫沉淀后,SDS-PAGE应该是几条带?


各位高手,做完免疫沉淀后,紧接着进行SDS-PAGE电泳,正常情况下应该是几条带?
如果是两条带应该怎么解释?

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最新回复

  • 8s5g (2013-7-27 17:26:48)


    出现几条条带理论上是正常的,因为目的蛋白可能拥有生理条件下自身结合的蛋白,在免疫沉淀的同时,可能也同时被沉淀下来了,个人观点!
  • yes4 (2013-7-27 17:28:03)

    这几条带中如果是目的蛋白不同状态造成的,那确实是正常现象
    不知道你有没有做对照,如果对照很好,那么就说明确实是目的蛋白的不同状态引起的
  • yes4 (2013-7-27 17:29:06)


    几条带都有可能,关键是设好对照
  • baidukk (2013-7-27 17:29:37)


    我的意思是:仅仅就目的蛋白做免疫沉淀,不考虑生理状态下与其结合的蛋白等,应该有几条带.请高手给我指点.不要说一些模棱两可的话,事物本事就没有绝对的,当然几条带都是正常的.
    我就是想知道理论情况下的答案 谢谢
  • wawa (2013-7-27 17:30:04)


    如果你的目标蛋白是均一的, 且只有一个亚基组成 (或者即使有多个亚基, 也是同源多聚体), 那就应该是一条带. 因为即使目的蛋白有不同的状态, 一般经SDS处理之后也都变成一样了.

    不过要考虑抗体的条带, 它与你的目的蛋白很易区分吧?
  • 3N4G (2013-7-27 17:30:45)


    应该考虑免疫球蛋白的重链和轻链
  • ququer787 (2013-7-27 17:31:13)


    有三条:目的带,重链,轻链。