【求助】ERK和p-ERK用什么内参？

字体: 小中大 | 打印发表于: 2013-8-13 17:35 作者: 987789 来源: 分析测试百科网

国内有作这两个蛋白的同仁吗？你们是用什么作内参呢？我觉得beta－actin肯定不行，因为ERK和p-ERK与beta－actin分子量都是42KD，跑胶分不开的。

zranqi_1 (2013-8-13 17:35:55)

做P-ERK一般都用总ERK作内参啊：）
vivian4123 (2013-8-13 17:36:22)

是不是做ERK和p-ERK、p38和p－p38就不需要beta－actin了？谢谢
xue258 (2013-8-13 17:36:40)

在不影响ERK的情况下，就不需要再做actin这些了，如果ERK有变化，那么需要actin，建议用tubulin做内参，或者GAPDH
zranqi_1 (2013-8-13 17:37:54)

关键要看你作的模型中，总蛋白是否有大的变化，可以先作一个总蛋白和ACTIN的对照。变化不大的话，即可用总蛋白做为内参，祝实验顺利
zranqi_1 (2013-8-13 17:38:23)

我们做的蛋白和actin的大小也差不多，没什么问题啊，我都是一次跑两块胶，或者一块胶重复上两次样品，转膜前切开。分别杂两种抗体就可以了。
u76mp (2013-8-13 17:38:50)

可是没钱买ERK，能否直接用beta-actin或GADPH做内参呢？
tianmei001 (2013-8-13 17:39:05)

可以不用内参，而不可以不用ERK，文献报道只给pERK与ERK不用内参。
finger (2013-8-13 17:40:27)

你可以在p-ERK和ERK做完之后，用保鲜膜封几天，然后在做ACTIN。这样就不会干扰了。哥的秘诀