【求助】双向电泳全过程探讨

字体: 小中大 | 打印发表于: 2013-8-17 16:44 作者: kuohao17 来源: 分析测试百科网

本话题是期望大家在做双向过程中遇到的问题及其解决发法呈上来，以便这块领域的人来了解和解决，减少新手们走弯路！各位可以从样品制备、试剂配制、胶条选择、水化、上样、等电聚集、平衡、SDS-PAGE、胶图分析等来谈谈自己的实验经过及疑问。

wood533 (2013-8-17 16:49:26)

我有个问题，一个新手一般多长时间能跑好双向？半年？一年？
@STAR@ (2013-8-17 16:49:50)

同意楼主话题！特别是像一些试验细节上的问题可以多拿出来讨论！
kuohao17 (2013-8-17 16:50:13)

我跑的胶图，曾经也是失败的，后来经过不断重复，只改动了DTT浓度顺利完成实验了。
flower-201 (2013-8-17 16:50:32)

请问你的文章投哪去了？接受了没？
kuohao17 (2013-8-17 16:51:22)

QUOTE:
原帖由 wood533 于 2013-8-17 16:49 发表

我有个问题，一个新手一般多长时间能跑好双向？半年？一年？
我是2周上手做了。
kuohao17 (2013-8-17 16:52:48)

QUOTE:
原帖由 flower-201 于 2013-8-17 16:50 发表
请问你的文章投哪去了？接受了没？
中国药理学报，修回了！
131415 (2013-8-17 16:53:12)

我跑的胶图，曾经也是失败的，后来经过不断重复，只改动了DTT浓度顺利完成实验了。

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DTT浓度一般应该为多少啊？有如此重要吗？
junhun (2013-8-17 16:57:38)

1、大家在裂解细胞提取蛋白时，DTT；DNase I；RNase A；PMSF；超声破碎的顺序是咋样的啊？？
2、PMSF要在加入DTT之前加入？
3、DNase I；RNase A是不是要在超声破碎后再加？
abc816 (2013-8-17 16:57:56)

PMSF要在加入DTT之前加入
finger (2013-8-17 17:06:47)

同样求解DTT；DNase I；RNase A；PMSF；超声破碎的顺序是咋样的啊？？