【求助】凝胶过滤预装柱堵了 怎么办？

最新回复

• wood533 (2013-8-19 17:42:55)

  碱黏度大，稍微有点堵如果还能流降低点流速，只要通的就用水多洗洗，然后参考说明书再用有机溶剂洗，实在没办法那就把柱子倒过来洗或反方向洗。

• 小荷尖尖 (2013-8-19 17:44:05)

  多谢版主回复！现在流速还不到50微升/min,估计要冲几天几夜才能把碱洗掉

• 小荷尖尖 (2013-8-19 17:44:24)

  我冲三天三夜了，柱子里黄色的污染物在缓慢下移，流速越来越慢了，现在已经是六分钟一滴了，倒过来冲又怕前功尽弃，毕竟污染物已明显向下移动了一截。
  
  另外，最近一直在做凝胶过滤，无论胞内还是胞外蛋白用s-100都能分出四五个峰，但一跑sds-page发现,后几个峰里仍然有大分子量的蛋白出现，是分子形状或疏水性的影响吗？我还想知道，是流速大时得到的峰浓度大还是流速小时的峰浓度大？

• 30moonriver (2013-8-19 17:46:28)

  
  你说的那种情况，通常是你的样品太杂了，凝胶过滤是不能把它们分开的

• www.1 (2013-8-19 17:47:27)

  
  现在是一天6ml的速度，我想知道柱子里那些黄黄的蛋白能出来吗？照现在的速度，我得再冲半个月，半个多月后会好吗？

• u234 (2013-8-19 17:48:29)

  
  晕死，再冲半个月，也太有耐心了吧。最好直接买跟新的

• 小荷尖尖 (2013-8-19 17:49:38)

  
  我决定把预装柱拆了

• 小荷尖尖 (2013-8-19 17:50:34)

  
  杂蛋白太多的时候凝胶过滤是不能起到很好作用的，清洗最好倒过来冲

• 小荷尖尖 (2013-8-19 17:51:12)

  
  非常感谢大家的回复，之所以倒冲好是不是因为柱头最脏，倒冲污染物会很快出来恢复流速？