【求助】大肠表达系统，高温能表达，低温表达不了？

最新回复

• daod (2013-8-19 18:09:28)

  同疑问，虽然有多种理由解释，但是没有找到一个文献性的支持。
  另外还做过，高温不表达，但是低温可以表达的。
  毒性，降解，折叠，还是什么代谢途径~~~
  同求帮

• NBA (2013-8-19 18:10:01)

  QUOTE:

  原帖由 daod 于 2013-8-19 18:09 发表
  同疑问，虽然有多种理由解释，但是没有找到一个文献性的支持。
  另外还做过，高温不表达，但是低温可以表达的。
  毒性，降解，折叠，还是什么代谢途径~~~
  同求帮 ...

  哈哈，这个其实得需要各种资源。一般实验室不具备的。
  
  当然也可能和蛋白质本身有关系。

• daod (2013-8-19 18:11:02)

  QUOTE:

  原帖由 NBA 于 2013-8-19 18:10 发表
  
  
  哈哈，这个其实得需要各种资源。一般实验室不具备的。
  
  当然也可能和蛋白质本身有关系。

  蛋白很个性，和蛋白本身当然是很有关系了。
  
  那么需要什么资源呢？

• daod (2013-8-19 18:11:23)

  有没有解决方案吗？技术手段之类的
  
  听说做几个点突变都可能促进蛋白表达出来

• 101010 (2013-8-19 18:12:16)

  
  低温条件下蛋白表达慢，是不是诱导时间太短了？可以用抗体检测下有没有表达，有可能是表达量太低，考马斯亮蓝染色检测不到。

• NBA (2013-8-19 18:12:59)

  QUOTE:

  原帖由 daod 于 2013-8-19 18:11 发表
  
  
  蛋白很个性，和蛋白本身当然是很有关系了。
  
  那么需要什么资源呢？

  主要是各种不同的宿主菌。可能有的适合表达不同的蛋白质，比如毒性，稀有密码子等。

• daod (2013-8-19 18:13:35)

  主要是各种不同的宿主菌。可能有的适合表达不同的蛋白质，比如毒性，稀有密码子等。
  
  ======================================================================================
  
  是啊，只是不知道怎么能够预测，减少一下工作量和资源消耗，总不好每一个蛋白都要把宿主菌试一遍，太浪费了……

• NBA (2013-8-19 18:14:03)

  QUOTE:

  原帖由 daod 于 2013-8-19 18:13 发表
  主要是各种不同的宿主菌。可能有的适合表达不同的蛋白质，比如毒性，稀有密码子等。
  
  ======================================================================================
  
  是啊，只是不知道怎么能够预测，减少一下工 ...

  任何预测都是一种算法，具体的都得是根据实际情况，有预测可溶性表达的网站，你可以把核苷酸序列给我，我给你看看稀有密码子及疏水情况。

• daod (2013-8-19 18:15:07)

  QUOTE:

  原帖由 NBA 于 2013-8-19 18:14 发表
  
  
  任何预测都是一种算法，具体的都得是根据实际情况，有预测可溶性表达的网站，你可以把核苷酸序列给我，我给你看看稀有密码子及疏水情况。

  我把以前做出来的蛋白拿出来分析，测测稀有密码子，算算疏水性。
  都不准啊~~~和实验结果很多都对不上

• NBA (2013-8-19 18:15:47)

  QUOTE:

  原帖由 daod 于 2013-8-19 18:15 发表
  
  
  我把以前做出来的蛋白拿出来分析，测测稀有密码子，算算疏水性。
  都不准啊~~~和实验结果很多都对不上

  其实正是因为这样的，才需要很多资源，看你的蛋白质重要与否了？