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GPO-PAP法测定血清(浆)三酰甘油
关键词：无机标准样品 土壤成分分析 药品对照品GPO-PAP法测定血清(浆)三酰甘油
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【实验原理】
血清(浆)中三酰甘油经脂蛋白脂酶(1ipoprotein lipase，LPL)作用，水解为甘油和游离脂肪酸(free fatty acid，FFA)；甘油在三磷酸腺苷(ATP)和甘油激酶(glycerokinase，GK)的作用下，生成3-磷酸甘油；经磷酸甘油氧化酶(glycerophosphate oxidase，GPO)作用氧化生成磷酸二羟丙酮和过氧化氢(H2O2)；H2O2与4-氨基安替比林(4-AAP)及4-氯酚在过氧化物酶(peroxidase，POD)(以上三者合称PAP)作用下，生成红色醌类化合物，其显色程度与TG的含量成正比。
【试剂与器材】
1．三酰甘油测定酶试剂组成
脂蛋白脂酶 ≥5000U／L
甘油激酶 ≥250U/L
磷酸甘油氧化酶 ≥3000u／L
过氧化物酶 ≥100U/L
ATP
≥2．0mmol／L
镁离子
40mmol／L
4-AAP
≥1．0mmol／L
4-氯酚
4．7mmol／L
胆酸钠
3．5mmo1／L
高铁氰化钾
1 μmol／L
脂肪醇聚乙二醇醚(fatty alcohol polyglycol ether)
0．65％
哌嗪-1-4-二乙基磺酸(PIPES)缓冲液(pH 6．8)
75mmol／L
2．采用定值的参考血清作标准。
3．仪器 自动生化分析仪或分光光度计。
【操作步骤】
1．自动分析法按仪器和试剂盒说明书的要求进行测定。
2．手工操作法取3支试管按表36-1操作，血清和酶试剂的比例是1：100，温育温度37℃，时间5分钟，光度分析波长500nm。
【结果计算】
测定管浓度=测定管吸光度/标准管吸光度×标准管浓度
该公式中测定管浓度指分析样本的三酰甘油浓度，标准液浓度指三酰甘油标准液的三酰甘油浓度，测定管吸光度指分析样本的吸光度值，标准管吸光度指三酰甘油标准液的吸光度值。
【参考区间】
合适范围：<1．70mmol／L(150mg／d1)：
边缘性升高：1．70～2．25mmol／L(150～1 90mg／d1)：
升高：>2．26mmol／L(200mg／d1)。
【临床意义】
TG受生活条件和饮食方式、年龄、性别等影响。轻至中度升高者，即2．26～5．63mmol／L(200～500mg／d1)，患冠心病的危险性增加；重度升高者，即≥5．63mmol／L(500mg／d1)时，常可伴发急性胰腺炎。
【样本采集和贮存】
血清TG易受饮食的影响，在进食脂肪后可以观察到血清中三酰甘油明显上升，2～4小时内即可出现血清混浊。因此，要求空腹12小时后再进行采血。其他同实验57。
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