【求助】不同的内参（GAPDH,ACTIN,TUBULIN）之间可以互换吗？

最新回复

• junhun (2013-10-07 14:07:15)

  虽然都是内参，但还是有一点区别，有的组织有些部位表达特定的内参比较少，这时需要选择其他的内参。选择内参主要的区别是他们的分子量，这几个内参的分子量是不同的，一般来说，再做WB时，要选择目的蛋白分子量与内参相差至少5kD以上的，才便于对结果的分析。

• 49888 (2013-10-07 14:07:48)

  
  取决于你的实验目的，如果只是考虑表明加样量一致，区别不大，不同蛋白用不同的内参，线粒体蛋白用cox4，总蛋白actin之类都可以，如果是考察通路，选敏感的内参，监视细胞状态。

• vcve (2013-10-07 14:08:13)

  可以选用组蛋白，组蛋白在细胞核中的表达是很稳定的，有很多都可以当成内参.

• gmjghh (2013-10-07 14:08:31)

  
  个人觉得选择内参至少应该考虑以下两个因素：
  1.内参分子量与目的条带分子量拉开；
  2.内参蛋白应该不受实验处理的影响，才能达到“半定量”的目的。

• S6044 (2013-10-07 14:08:51)

  虽然都是内参，但还是有一点区别，有的组织有些部位表达特定的内参比较少，这时需要选择其他的内参。选择内参主要的区别是他们的分子量，这几个内参的分子量是不同的，一般来说，再做WB时，要选择目的蛋白分子量与内参相差至少5kD以上的，才便于对结果的分析。

• pou (2013-10-07 14:09:09)

  
  本人是菜鸟级别， 弱弱的问一下为什么一定要用内参啊

• 89tongzijun (2013-10-07 14:09:32)

  本人是菜鸟级别， 弱弱的问一下为什么一定要用内参啊
  
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  不用内参，怎么知道你实验用的样品，上样量都是一致的呢？

• pou (2013-10-07 14:10:05)

  不用内参，怎么知道你实验用的样品，上样量都是一致的呢？
  
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  还是不太懂，能否讲解详细一点哈？嘿嘿，还有楼主说的GAPDH、ACTIN、tubulin这些内参是做与蛋白结合的么？