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【求助】western-blot电泳时出现奇怪现象！
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今日实验室一师妹跑胶，浓缩胶5%，分离胶12%，上样后按照我们一贯的程序60V跑浓缩胶，但是却出现了溴酚蓝乱串的现象，而跑到浓缩胶分离胶交界处溴酚蓝却平齐了，之后的分离胶也与正常无异。我们的初步分析是，师妹新买了碧云天的lordingBuffer，应该是lordingbuffer的问题，特传上图两张与大家一起探讨！
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最新回复
lorri (2013-10-22 19:53:51)
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lorri (2013-10-22 19:54:10)
最左边的是marker 也是正常整齐
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ha111 (2013-10-22 19:55:15)
ha111 (2013-10-22 19:55:38)
我认为与温度也是有关系的。
yes4 (2013-10-22 19:56:14)
sunshine039 (2013-10-22 19:56:47)
这个问题很大可能出现在加样的时候，加样时枪头向加样孔中用力过大，两玻璃板之间距离轻微型变，浓缩胶与板之间分离，样品进入胶与玻璃板之间，（不信你再用枪头用力挤挤试试）
tie8 (2013-10-22 19:58:18)
同意楼上意见，因为我就有过这样很相似的经历，加样的时候注意控制力道。还有就是若上次做完实验后，清洗完玻璃板，若放在烤箱里烘干，一定要等其完全冷却完后再灌胶，不然会因玻璃板热胀冷缩，出现点样后，跑电泳的时候出现楼主这种情况。
wmp1234 (2013-10-22 19:58:49)
我的经验是上样缓冲液没有混匀，甘油不足
ladyhuahua (2013-10-22 19:59:22)
是不是胶干了，或者是胶和板子之间有缝隙
831226 (2013-10-22 20:00:20)
我遇到过，个人觉得与分离胶凝固弃去上层水后，未等待完全干燥即灌浓缩胶有关，这样使得分离胶上、浓缩胶与玻璃板之间存在水分，导致buffer出现小片流动。在等待干燥后再灌胶，情况明显好转。
jrwyyplt (2013-10-22 20:00:53)
玻璃板漏了，预制胶过期后收缩也这样
KGZ564 (2013-10-22 20:01:33)
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