【求助】蛋白总是遇到包涵体,怎么办?

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【求助】蛋白总是遇到包涵体,怎么办?

如题,我是用PET系统原核表达histag蛋白的,最近无论做什么蛋白,都是包涵体,优化了表达条件,仍然如此,郁闷啊!各位大侠帮帮我吧,谢谢!
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最新回复

  • jujuba (2013-11-12 21:49:42)


    楼主是在是多少温度诱导表达的?我们都是20-25度诱导。
  • 流星锤 (2013-11-12 21:50:11)

    QUOTE:

    原帖由 jujuba 于 2013-11-12 21:49 发表

    楼主是在是多少温度诱导表达的?我们都是20-25度诱导。
    16度诱导20个小时左右~
  • jujuba (2013-11-12 21:51:22)

    这样啊,那就很奇怪了。低温诱导应该有可溶蛋白的表达啊。
  • zhezhe (2013-11-12 21:51:56)


    换一个表达系统试试
  • 流星锤 (2013-11-12 21:52:34)

    QUOTE:

    原帖由 zhezhe 于 2013-11-12 21:51 发表

    换一个表达系统试试
    你是指换成真核表达系统吗?
  • bluelake (2013-11-12 21:52:52)


    origami试下
  • Ao7 (2013-11-12 21:54:32)


    低温诱导,或者换表达系统。
  • 流星锤 (2013-11-12 21:54:58)

    QUOTE:

    原帖由 Ao7 于 2013-11-12 21:54 发表

    低温诱导,或者换表达系统。
    可是我已经16度诱导了,够低温了啊,是不是要换成真核表达系统呢?
  • abc816 (2013-11-12 21:55:17)


    我在四度冷库做过。如果你有条件,可以尝试。
  • chuntian1983 (2013-11-12 21:56:08)


    可以试试带氯霉素抗性的感受态试试,我师姐试过,可溶表达量明显提高了,也是pet系列的载体。
  • 流星锤 (2013-11-12 21:56:37)

    QUOTE:

    原帖由 chuntian1983 于 2013-11-12 21:56 发表

    可以试试带氯霉素抗性的感受态试试,我师姐试过,可溶表达量明显提高了,也是pet系列的载体。
    谢谢啊,请问是具体什么样的感受态细胞呢?
  • chuntian1983 (2013-11-12 21:57:07)

    BL21(DE3)plys
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