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【求助】免疫沉淀后,SDS-PAGE应该是几条带?
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发表于: 2013-11-15 22:48 作者: ffaa 来源: 分析测试百科网
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【求助】免疫沉淀后,SDS-PAGE应该是几条带?
各位高手,做完免疫沉淀后,紧接着进行SDS-PAGE电泳,正常情况下应该是几条带?
如果是两条带应该怎么解释?
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【求助】免疫沉淀后,SDS-PAGE应该是几条带?
我也来说两句
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最新回复
gogo
(2013-11-15 22:48:57)
出现几条条带理论上是正常的,因为目的蛋白可能拥有生理条件下自身结合的蛋白,在免疫沉淀的同时,可能也同时被沉淀下来了,个人观点!
abc816
(2013-11-15 22:49:17)
这几条带中如果是目的蛋白不同状态造成的,那确实是正常现象
不知道你有没有做对照,如果对照很好,那么就说明确实是目的蛋白的不同状态引起的
vera+
(2013-11-15 22:49:38)
几条带都有可能,关键是设好对照
ffaa
(2013-11-15 22:50:22)
我的意思是:仅仅就目的蛋白做免疫沉淀,不考虑生理状态下与其结合的蛋白等,应该有几条带.请高手给我指点.不要说一些模棱两可的话,事物本事就没有绝对的,当然几条带都是正常的.
我就是想知道理论情况下的答案 谢谢
wanglaoshi
(2013-11-15 22:50:42)
如果你的目标蛋白是均一的, 且只有一个亚基组成 (或者即使有多个亚基, 也是同源多聚体), 那就应该是一条带. 因为即使目的蛋白有不同的状态, 一般经SDS处理之后也都变成一样了.
不过要考虑抗体的条带, 它与你的目的蛋白很易区分吧?
gmjghh
(2013-11-15 22:51:03)
应该考虑免疫球蛋白的重链和轻链
skytree
(2013-11-15 22:51:25)
有三条:目的带,重链,轻链。
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我也来说两句
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【求助】免疫沉淀后,SDS-PAGE应该是几条带?
最新回复
gogo (2013-11-15 22:48:57)
出现几条条带理论上是正常的,因为目的蛋白可能拥有生理条件下自身结合的蛋白,在免疫沉淀的同时,可能也同时被沉淀下来了,个人观点!
abc816 (2013-11-15 22:49:17)
不知道你有没有做对照,如果对照很好,那么就说明确实是目的蛋白的不同状态引起的
vera+ (2013-11-15 22:49:38)
几条带都有可能,关键是设好对照
ffaa (2013-11-15 22:50:22)
我就是想知道理论情况下的答案 谢谢
wanglaoshi (2013-11-15 22:50:42)
如果你的目标蛋白是均一的, 且只有一个亚基组成 (或者即使有多个亚基, 也是同源多聚体), 那就应该是一条带. 因为即使目的蛋白有不同的状态, 一般经SDS处理之后也都变成一样了.
不过要考虑抗体的条带, 它与你的目的蛋白很易区分吧?
gmjghh (2013-11-15 22:51:03)
skytree (2013-11-15 22:51:25)
有三条:目的带,重链,轻链。
【求助】免疫沉淀后,SDS-PAGE应该是几条带?