【求助】溶解的蛋白质溶液是不是应该是澄明的

最新回复

• 2541 (2013-11-28 15:16:02)

  
  可能是有蛋白沉淀。溶液很浓时也有浑浊的现象。

• 33号 (2013-11-28 15:16:30)

  蛋白浓度高>10mg/ml的时候一般溶液变的很浑浊。还有用硫酸铵沉淀后再溶解时，有时候也不是很透明，可能有杂质和色素。
  蒸馏水透析的时候，蛋白质都有少量的沉淀。蛋白质比较稳定的在PBS.

• 轰轰 (2013-11-28 15:19:01)

  
  PBS是不是指Na2HPO3+NaH2PO4,需不需要加NaCl呢？

• 2541 (2013-11-28 15:19:29)

  
  PBS 有好几样配方，有不同离子强度的和缓冲容量的，具体做什么实验参与相应的配法。如darzy 所说，有时杂质也会使溶液泛浑，脂类什么的。

• 轰轰 (2013-11-28 15:19:59)

  
  我怀疑是PH的变化使得蛋白沉淀？
  主任可以介绍一下配方吗？
  谢谢阿

• 2541 (2013-11-28 15:20:43)

  
  PBS
  10-20mM Na-P,150mM NaCl.pH 7.3-7.4.
  有钾离子更好。

• zhenxin (2013-11-28 15:23:52)

  
  PH、离子强度的改变都会导致蛋白质在透析后沉淀。我的经验是加入1%的甘氨酸和5%的甘油，这些物质会干扰蛋白质的聚集。

• xyw5 (2013-11-28 15:24:36)

  
  我觉得与蛋白质的等电点也有关系。
  上次我用PB（不含Nacl的PBS，PH7.4）溶解蛋白（碱性蛋白），结果一段时间后也出现了沉淀，而且很不易溶。最后我为了测定蛋白浓度只好将之在37度水浴溶解后再测。（我的蛋白是变性的，线性表位即可）
  我想下次用PH稍高的缓冲液溶解蛋白

• am10 (2013-11-28 16:57:15)

  
  我做过PB和PBS的透析的比较，发现PBS比PB出现的沉淀量减小了很多，出现的个例也少了很多。

• eric930 (2013-11-28 16:58:01)

  蛋白浓度高>10mg/ml的时候一般溶液变的很浑浊。还有用硫酸铵沉淀后再溶解时，有时候也不是很透明，可能有杂质和色素。
  蒸馏水透析的时候，蛋白质都有少量的沉淀。蛋白质比较稳定的在PBS.
  
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  请问用去离子水透析时出现的沉淀是因为变性了吗？如何处理这些沉淀？