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【求助】ERK和p-ERK用什么内参?
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发表于: 2013-11-30 16:04 作者: PCR 来源: 分析测试百科网
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【求助】ERK和p-ERK用什么内参?
国内有作这两个蛋白的同仁吗?你们是用什么作内参呢?我觉得beta-actin肯定不行,因为ERK和p-ERK与beta-actin分子量都是42KD,跑胶分不开的。
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【求助】ERK和p-ERK用什么内参?
我也来说两句
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最新回复
guagua
(2013-11-30 16:04:48)
做P-ERK一般都用总ERK作内参啊:)
fox_79
(2013-11-30 16:05:59)
做P-ERK一般都用总ERK作内参啊:)
sunnyB
(2013-11-30 16:06:36)
是不是做ERK和p-ERK、p38和p-p38就不需要beta-actin了?谢谢
huifeng0516
(2013-11-30 16:07:58)
在不影响ERK的情况下,就不需要再做actin这些了,如果ERK有变化,那么需要actin,建议用tubulin做内参,或者GAPDH
fox_79
(2013-11-30 16:08:35)
关键要看你作的模型中,总蛋白是否有大的变化,可以先作一个总蛋白和ACTIN的对照。变化不大的话,即可用总蛋白做为内参,祝实验顺利
fox_79
(2013-11-30 16:08:55)
我们做的蛋白和actin的大小也差不多,没什么问题啊,我都是一次跑两块胶,或者一块胶重复上两次样品,转膜前切开。分别杂两种抗体就可以了。
vivian4123
(2013-11-30 16:11:16)
可是没钱买ERK,能否直接用beta-actin或GADPH做内参呢?
flower-201
(2013-11-30 16:11:42)
可以不用内参,而不可以不用ERK,文献报道只给pERK与ERK不用内参。
eric930
(2013-11-30 16:12:03)
你可以在p-ERK和ERK做完之后,用保鲜膜封几天,然后在做ACTIN。这样就不会干扰了。哥的秘诀
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【求助】ERK和p-ERK用什么内参?
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guagua (2013-11-30 16:04:48)
做P-ERK一般都用总ERK作内参啊:)
fox_79 (2013-11-30 16:05:59)
做P-ERK一般都用总ERK作内参啊:)
sunnyB (2013-11-30 16:06:36)
是不是做ERK和p-ERK、p38和p-p38就不需要beta-actin了?谢谢
huifeng0516 (2013-11-30 16:07:58)
fox_79 (2013-11-30 16:08:35)
关键要看你作的模型中,总蛋白是否有大的变化,可以先作一个总蛋白和ACTIN的对照。变化不大的话,即可用总蛋白做为内参,祝实验顺利
fox_79 (2013-11-30 16:08:55)
我们做的蛋白和actin的大小也差不多,没什么问题啊,我都是一次跑两块胶,或者一块胶重复上两次样品,转膜前切开。分别杂两种抗体就可以了。
vivian4123 (2013-11-30 16:11:16)
可是没钱买ERK,能否直接用beta-actin或GADPH做内参呢?
flower-201 (2013-11-30 16:11:42)
可以不用内参,而不可以不用ERK,文献报道只给pERK与ERK不用内参。
eric930 (2013-11-30 16:12:03)
你可以在p-ERK和ERK做完之后,用保鲜膜封几天,然后在做ACTIN。这样就不会干扰了。哥的秘诀
【求助】ERK和p-ERK用什么内参?