最新更新主题

【求助】pet32a融合表达

字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2013-12-02 16:44    作者: biabiade    来源: 分析测试百科网

查看完整版本请点击这里：
【求助】pet32a融合表达
我用pet32a这个载体融合表达一个大约5kb的蛋白。用IPTG诱导后在25Kd附近有了新的条带。但是作为对照的pet32a诱导前后似乎没有什么变化，这是怎么回事呢？按理说应该有个trA的硫氧还蛋白亚？
请教各位高手了！
查看完整版本请点击这里：
【求助】pet32a融合表达

我也来说两句 查看全部回复

最新回复

  • 小糖块 (2013-12-02 16:45:08)

    你说的是kb还是kD？
    如果对照的pet32A在诱导前后没变化，那别的就不要谈了。

  • biabiade (2013-12-02 16:45:34)

    不好意思 打错了 是KD
    但是为什么重组菌能表达呢？

  • am10 (2013-12-02 16:45:55)


    用pET32a表达，根据我过去的经验，很少能见到载体本身表达的，我做了很多次，只有一次见到载体诱导后有Thioredoxin融合蛋白的表达。所以我的意思是，这是很正常的。

  • flower-201 (2013-12-02 16:47:06)


    我所做的pet32a对照，全部都有TRX表达，诱导后应该表达才正常，如果TRX都不表达，后面的蛋白表达的确难以让人理解，呵呵

  • yapuyapu (2013-12-02 16:47:26)

    我也做pet32a的融合表达，对照都有TRX表达。本来在别的质粒上表达是包涵体的目的蛋白在32a几乎全都是可溶表达了，但是活力检测基本没有活力，请问各位有没有切除标签以后可以显著增加活性的经验啊？

  • flower-201 (2013-12-02 16:47:52)


    我想冒昧问一句，TRX蛋白有多大呢？

  • 131415 (2013-12-02 16:48:18)

    QUOTE:

    原帖由 flower-201 于 2013-12-2 16:47 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')

    我想冒昧问一句，TRX蛋白有多大呢？
    11kD

  • biabiade (2013-12-02 16:48:43)

    QUOTE:

    原帖由 flower-201 于 2013-12-2 16:47 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')

    我想冒昧问一句，TRX蛋白有多大呢？
    16-17kd吧？

  • wmp1234 (2013-12-02 16:49:08)

    这么小的蛋白你做SDS-PAGE的时候看的到吗？一般我们做的时候Marker都只有5个而不是7个，你的是不是也跑出去了？
查看全部回复 我也来说两句
查看完整回复请点击这里：
【求助】pet32a融合表达