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【求助】WB 目的蛋白为什么不在同一水平？

字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2013-12-07 16:34    作者: prettygirl@    来源: 分析测试百科网

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【求助】WB 目的蛋白为什么不在同一水平？

遇见一个现象，不得其解 特请教经验人士

同一目的蛋白，上样量不一致（主要是为了选择一个合适的上样量范围）

发光结果显示

1 目的蛋白不在同一水平，呈“阶梯状”，上样量大的再后面

2 另外目的蛋白不知为何不呈 “线状”，而成“方形”

不知这是什么原因所致？【蛋白降解可能性决定不大，因为同一样品分装保存，其他的目的蛋白无此种现象】

目的蛋白为Apo-D，血浆样品。图示如下（重复了2次）
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  • loli (2013-12-07 16:34:59)

    差得不多啊
    你电泳时注意没注意降温啊？否则中间部分的胶融化会导致不同泳道的条带不平
    条带成方形 应该是积层胶压缩效果不好吧

  • prettygirl@ (2013-12-07 16:35:21)

    QUOTE:

    原帖由 loli 于 2013-12-7 16:34 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
    差得不多啊
    你电泳时注意没注意降温啊？否则中间部分的胶融化会导致不同泳道的条带不平
    条带成方形 应该是积层胶压缩效果不好吧
    平时环境温度比较高时，电泳会放在4度或碎冰中。

    现在环境温度基本就是几度，就直接电泳了。 这个应该不是主要原因，之前的实验也是如此条件，都是平齐的（另外的蛋白）

    没有压缩好 倒是不能排除

  • 30moonriver (2013-12-07 16:35:39)


    我也遇到了类似的问题，现在每次电泳时都会发现溴酚蓝不在一个水平，而且电泳条带奇形怪状，以前都很好，现在转膜后会发现各孔之间的蛋白长短不一，请高指教啊！

  • bluelake (2013-12-07 16:49:01)

    跑电泳会遇到这样的情况，因为你上样是有先后顺序的，先上样自然扩散快，跑时当然不在一个水平，尤其是你用的小孔梳子，我建议你用大孔梳子，让样品充分展开，这样跑起来一不会有太明显的阶梯状，二不会呈方形！

  • prettygirl@ (2013-12-07 16:49:25)

    QUOTE:

    原帖由 bluelake 于 2013-12-7 16:49 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
    跑电泳会遇到这样的情况，因为你上样是有先后顺序的，先上样自然扩散快，跑时当然不在一个水平，尤其是你用的小孔梳子，我建议你用大孔梳子，让样品充分展开，这样跑起来一不会有太明显的阶梯状，二不会呈方形！ ...
    这次又重复了一次，同一个样品不同浓度基本在一个水平线，不过还是“方形”。。。。

  • wanglaoshi (2013-12-07 16:49:52)


    可能是你配制的浓缩胶的PH值不对，对样品没有起到压缩的作用吧！

    溴酚蓝跑的不齐可能是你电泳时胶底下有气泡。
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