检测小鼠肝脏的caspase活性

细胞发生凋亡时，除了形态学变化以外，还会发生一系列生化事件。其中，caspase酶的依次激活是凋亡重要的生化改变。Proemga公司的Caspase-Glo® Assays(a,b) (以下称Caspase-Glo®检测试剂盒)是一种检测caspase活力的均质发光检测方法。试剂盒中提供了一种氨基萤光素发光前体底物(含蛋白酶识别序列)和专利的耐热萤光素酶，试剂已经经过优化。加入Caspase-Glo® 试剂会导致细胞裂解, 随后caspase将底物裂解。释放出的游离氨基萤光素被Ultra-GloTM 重组萤光素酶作用后产生一种"辉光型"的发光信号。该信号的强弱与caspase 的活性成正比。稳定的萤光素酶和专利的缓冲液使得该试剂盒在不同的实验条件下都可发挥很好的性能。不同于荧光或比色分析法，该发光分析法不易被其他化合物的干扰而影响。Caspase-Glo® 3/7,8和9试剂盒可以用多孔板模式，既可用于纯化的酶测定，也可直接在培养的细胞中应用。Caspase-Glo® 2和6试剂盒用于纯酶制备。