查看完整版本请点击这里：
【求助】请帮我看一下电泳图，为什么会这样？
【求助】请帮我看一下电泳图，为什么会这样？
相关疾病：
头痛
各位大侠，请帮我看看这几张电泳图，第一次是用伯乐的17CM PH3-10线形胶条，3-10的两性电解质液跑的，上样量约1mg,上样体积约400ul，使用仪器是伯乐的双向电泳系统，聚焦60000VH；第二次用伯乐的17CM PH4-7线形胶条，3-10的两性电解质液，上样量约1.3mg,上样体积约600ul，使用仪器是GE的双向电泳系统，聚焦65000VH。 由于第一次用3-10的胶条，蛋白过于集中，所以第二次选用了4-7的胶条，结果就出现很多横条纹了，而且主要集中在酸性端。已经用了两包胶条了，依然没有一个非常满意的结果，真的是非常头痛！ 这还是好一点的几张图，另外一次提的样品横条纹更多！ 不知道到底是什么原因。样品盐过多？胶条选择不正确？为什么就集中在一端呢，这已经是搭了盐桥的。 另外上样量好像还不是很够，不知道上样体积最大能达到多少啊？ 我已经用到差不多600ul了。
这是第一次A组：
查看完整版本请点击这里：
【求助】请帮我看一下电泳图，为什么会这样？
【求助】请帮我看一下电泳图，为什么会这样？
78191377.jpg
最新回复
summerxx (2013-12-12 14:36:43)
这是第一次B组：
94645813.jpg
summerxx (2013-12-12 14:37:02)
第二次A组：
62298065.snap.jpg
summerxx (2013-12-12 14:37:22)
17215536.snap.jpg
831226 (2013-12-12 14:39:20)
不出意外，应该是植物的样品吧。不知道你的电压上升情况 是否稳定在8000v，
另外一般情况下17,18cm的上样体积是350ul，不宜过多否则胶条也吸不完的，如果样品浓度没那么高也没问题，上满体系，一般》500ug考然还是可以出很多点的，当然最好1mg。横纹问题不是很严重，高丰度蛋白聚焦不完全很正常，可以尝试延长聚焦时间 80000vhr
summerxx (2013-12-12 14:40:48)
QUOTE:
谢谢楼上的回答，我这是细菌的全蛋白，不知您说的聚焦时间是否指的只是聚焦那一步，也就是快速上升到10000V的那一步呢? 因为在快速升到10000V之前，我还有一步是线形升至10000V的，这个跑了30000VH，两者加起来的话总共有95000VH了。 如果您指的只是那一步，那我确实可以尝试 延长到80000VH，因为我感觉还没有很明显的聚焦过度的迹象。 另外我发现我同学用线形PH3-10胶条跑的时候，蛋白都集中在胶的中间一块，但换成非线性3-10的胶条后，蛋白就分的比较开了，似乎比4-7的胶条分开效果并不差。 不知用非线性3-10的胶条 是不是确实分开效果会比较好？
ero11 (2013-12-12 14:41:10)
恩 可以稍加延长，而且4-7的聚焦时间更长一点为好，个人认为用4-7的分离胶较好；
ero11 (2013-12-12 14:41:42)
会不会是配胶的问题？可以尝试用一下预制胶。
【求助】请帮我看一下电泳图，为什么会这样？