【求助】溶解多肽冻干粉怎么防氧化

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• 阿凡提 (2013-12-14 22:26:03)

  您的冻干粉应该就已经是氧化态了！冻干过程中是与空气接触的，除非您用氮气之类的保护。

• linlinstar (2013-12-14 22:26:35)

  QUOTE:

  原帖由 阿凡提 于 2013-12-14 22:26 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  您的冻干粉应该就已经是氧化态了！冻干过程中是与空气接触的，除非您用氮气之类的保护。

  是用惰性气体保护着的，就是不知道用什么合适的方法溶解，实验急需啊。又不敢轻易地做。。。

• 阿凡提 (2013-12-14 22:27:10)

  QUOTE:

  原帖由 linlinstar 于 2013-12-14 22:26 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  
  是用惰性气体保护着的，就是不知道用什么合适的方法溶解，实验急需啊。又不敢轻易地做。。。

  这个没有经历过，不过感觉用充分加热的蒸馏水（蒸掉水中溶解氧）再加点强还原剂消耗掉水中溶解的氧气并用氮气做保护应该就可以了，强还原剂似乎可以选用维生素C如果需要脂溶性的保护的话可以考虑维生素E（这个能在水表面形成还原性保护油膜，最后加入似乎可以保护您的反应过程）。但是您得确定维生素C氧化之后产生的酸性物质是否能影响您的实验，必要时用缓冲液。
  纯属建议，如果没有现成的，您可以考虑尝试一下。

• linlinstar (2013-12-14 22:27:34)

  QUOTE:

  原帖由 阿凡提 于 2013-12-14 22:27 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  
  这个没有经历过，不过感觉用充分加热的蒸馏水（蒸掉水中溶解氧）再加点强还原剂消耗掉水中溶解的氧气并用氮气做保护应该就可以了，强还原剂似乎可以选用维生素C如果需要脂溶性的保护的话可以考虑维生素E（这个能在水表面形成 ...

  非常感谢你的建议。。。。无氧水制备后等到冷却再溶多肽吗？如果温度高会不会影响多肽呢？

• 阿凡提 (2013-12-14 22:30:05)

  
  保守点，我会选择室温溶解，除非您确定您的多肽能跟Tag酶一样耐热。冷却和溶解过程在氮气保护情况下进行（您可以趁热把氮气接个玻璃管插进液体慢慢吹泡，瓶口堵上点棉花，这样应该能保证冷却过程不吸入空气）。以前做过抗体蛋白交联化疗药物，记得也是用氮气做保护，大约是类似的方法。您看看做交联的有没有能参考的资料。另外一般无机还原剂应该也能有些价值，比如硫代硫酸钠，但是也应该需要缓冲液。
  很感谢您的信任，不过我也没做过这种实验，只能给您一些近于凭空的建议而已。

• lixi559 (2013-12-14 22:30:29)

  在纯化的时候，可以加微量抗氧化剂，如Dtt等，可以防止样品被氧化。不过Dtt对核磁的检测结果有一定的影响

• dhpbj (2013-12-14 22:30:52)

  
  加点EDTA防氧化

• birdfish (2013-12-14 22:31:18)

  QUOTE:

  原帖由 dhpbj 于 2013-12-14 22:30 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  加点EDTA防氧化

  EDTA防氧化还真是第一次听说，能否解释一下机理，或贴一下文献？