【求助】实验室没有超声设备，怎么提取细菌总蛋白？

最新回复

• duoduo (2013-12-16 16:50:30)

  
  如果有均质机可以用均质机，
  超声清洗仪和超声仪不一样吧

• xue258 (2013-12-16 16:51:32)

  
  提取细菌总蛋白的方法应该很多的，最简单不需要什么复杂设备的是反复冻融法破菌，其次可以用7M盐酸胍直接破菌并溶解所有的蛋白，但是缺陷在于将所有的蛋白质都变性了，适用于包涵体蛋白；此外可以用溶菌酶或者高压匀浆的方法裂菌取总蛋白。

• 89tongzijun (2013-12-16 16:51:50)

  
  谢谢各位了，准备试试战友提供的几种方法，以前实验室里采用反复冻融+超声的方法效果不错，现在这个实验室没有超声仪器只好用其他替代方法了

• 66小飞侠 (2013-12-16 16:52:26)

  
  可以用溶菌酶+核酸酶啊，1mg/ml溶菌酶 + 10ug/ml DNA酶I，室温处理30min就可以了

• mamamiya (2013-12-16 16:52:49)

  
  我破菌时是用1mg/ml溶菌酶 + 100ug/ml DNA酶I，还有一个是1M MgSO4室温搅拌一个小时后，-80度冻结后再解冻就OK了。

• linlinstar (2013-12-16 16:54:57)

  
  直接用石英砂研磨也行啊，我以前做过的，表达的是个酶，表达后就是用石英砂研磨破碎提取蛋白的

• yes4 (2013-12-16 16:55:18)

  请问楼上的说用石英砂研磨法，具体方法是怎样操作啊，能具体说一下吗？谢谢！