最新更新主题

【求助】请教磷酸化蛋白的条件？

字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2013-12-16 21:23    作者: 阿k    来源: 分析测试百科网

查看完整版本请点击这里：
【求助】请教磷酸化蛋白的条件？

我前段时间做了几次wb,感觉有的好，有的不好。但是总体来说，磷酸化的蛋白都做得不好，比如pERK，pCREB。不知道怎么回事，背景挺高，请大家给我支支招...

谢谢！

我的条件：
ERK和pERK都是Santa cruz的，1:1500,。
CREB和pCREB都是Cell Signalling的，1:1000。

用普利莱的快速封闭液，含有磷酸酶抑制剂的，抗体都是用TBST配的。
查看完整版本请点击这里：
【求助】请教磷酸化蛋白的条件？

我也来说两句 查看全部回复

最新回复

  • 阿k (2013-12-16 21:24:04)


    这个是pERK的条带...
    好像不行吧？


    97846939.jpg

  • 阿k (2013-12-16 21:25:46)


    同一个膜，再生以后做的ERK


    41148660.jpg

  • 阿k (2013-12-16 21:26:07)


    另一次实验，做的pERK就很惨烈了...


    53083499.jpg

  • 阿k (2013-12-16 21:26:34)


    CREB的也不行。。。


    97863355.jpg

  • 阿k (2013-12-16 21:26:58)


    pCREB就更不行了。。。


    37641386.jpg

  • 阿k (2013-12-16 21:27:24)


    同一张膜，再生以后做actin，好像还行。。。


    16866030.jpg

  • 阿k (2013-12-16 21:27:42)

    为什么差别会这么大呢？请教大家...

    如果需要条件，我会进一步提供...

  • 阿k (2013-12-16 21:28:11)


    pCREB我用BSA配过一次，还是很糟糕的图...

  • kswl870 (2013-12-16 21:28:34)

    我买的也是这种抗体，还没有做。

    是与抗体有关吗？你找到解决了吗？
查看全部回复 我也来说两句
查看完整回复请点击这里：
【求助】请教磷酸化蛋白的条件？