【求助】蛋白保存

最新回复

• 6327555 (2013-12-21 09:28:18)

  
  添加5-20%甘油
  0.5mM EDTA

• standbyme (2013-12-21 09:28:40)

  
  我看有的地方说解冻的时候不要放4度，37度直接化冻可以减少沉淀产生

• ladyhuahua (2013-12-21 09:29:04)

  我遇到了和你一样的问题 后来就直接在4°保存了

• rxcc33 (2013-12-21 09:29:23)

  
  纯化后冷冻干燥,用时再复溶.

• c86v (2013-12-21 09:29:47)

  
  可目前我们实验室还没有冷冻干燥机，还有其他方法吗

• yjf1026 (2013-12-21 09:30:38)

  
  有沉淀，再溶解就行了吧

• tangxin_80 (2013-12-21 09:31:00)

  看蛋白的溶解度如何，不要太高浓度。
  
  我的蛋白30mg/ml还挺稳定。

• ritou1985 (2013-12-21 09:38:04)

  
  不同的蛋白不同，所以不能一概而论。
  你提到的直接放-20C肯定不行。冻一定要速冻，即使很强悍的蛋白，直接放-20 C缓冻也是不好的。分管在液氮中冻存。
  不知道你冻存后的目的是干什么，如果50 %的甘油不对你的后续操作有影响的话可以尝试，但这时就不能用液氮了，直接放-20 C，在这个浓度的甘油下是不会冻的。
  有的蛋白在4 C可以放几个月。有的蛋白经液氮冻了后放-80 C还是不行。
  蛋白总是个例，人家的经验都是小马过河，适合自己蛋白的方法要自己去试。
  good luck

• fox_79 (2013-12-21 09:38:49)

  看你蛋白的来源，比如说你的蛋白来源于海洋中的生物就需要0.5M左右的NaCl中才比较稳定，否则冻融一次就容易出现沉淀。一般来说如果加甘油对你的蛋白没有影响你就加入20%左右即可。

• remenb (2013-12-21 09:39:08)

  
  我的几个蛋白都是直接在buffer保存于-20C，不用加甘油的，也没有问题。
  不同的蛋白差很大的。

• greenbee (2013-12-21 09:39:33)

  添加5-20%甘油
  0.5mM EDTA
  
  ===============================================
  
  请问，加EDTA的作用是什么，是防止蛋白酶的降解作用吗？
  谢谢

• c86v (2013-12-21 09:40:08)

  是的，ＥＤＴＡ螯合金属离子，通常酶的活性离不开金属离子

• remenb (2013-12-21 09:41:19)

  
  是啊 我现在也是碰到这种情况 郁闷
  不同的蛋白不同的方法 搞一个就要费神一会 郁闷