【求助】离子交换层析

最新回复

• glass (2013-12-26 17:02:04)

  DEAE32和DEAE52都是纤维素为基质的离子交换介质，其性能通常比琼脂糖（sepharose，Agrose）为基质的介质差，易盐缩，不耐压，流速低。
  中性蛋白阴、阳离子交换介质都可以尝试，不要只局限于文献中的“DEAE32和DEAE52”，个人觉得可以尝试Q和SP。

• 暗香涌 (2013-12-26 17:02:41)

  
  感谢大家的关注！请问谁有离子交换填料的类型及产品介绍，我在找不到全的，谢谢！

• 暗香涌 (2013-12-26 17:04:21)

  
  我想分离分子量6KD以内的蛋白质，请问我选强阴离子交换剂还是弱阴离子交换剂？哪个效果更好？

• duoduo (2013-12-26 17:30:49)

  
  我觉得阴离子、阳离子都无所谓，要具体看buffer的pH，浓度等等。现在常用的一般都用GE的填料，你可以到GE的网站看一下，都很清楚的

• ero11 (2013-12-26 17:32:01)

  QUOTE:

  原帖由 duoduo 于 2013-12-26 17:30 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  我觉得阴离子、阳离子都无所谓，要具体看buffer的pH，浓度等等。现在常用的一般都用GE的填料，你可以到GE的网站看一下，都很清楚的

  离子层析与蛋白分子量没有太大关系
  填料和体系的选择还是要看实际情况的，一般情况下是让蛋白挂上柱，选阳柱的时候你的缓冲体系要低于你的蛋白PI 1个单位，选阴柱的时候你的缓冲体系要高于你的蛋白PI 1个单位
  再去用合适的NaCl浓度去洗脱，一般摸条件用梯度洗脱比较好
  同意楼上的观点，不要套用资料说的那些古老的纤维素填料，选择常用的琼脂糖（Sepharose)的完全能替代那些纤维素填料

• 暗香涌 (2013-12-26 17:32:23)

  
  同学也说用琼脂糖系列的要比纤维素系列的要好，那我选Q Sepharose FastFlow型号的就应该合适吧？