【求助】western难题

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• junjie05 (2014-1-07 17:50:21)

  能否说明一下三个什么抗体，针对什么样品？
  电泳图和WB图能发上来看看吗？
  阴性、阳性对照有吗？

• tianmei001 (2014-1-07 17:50:45)

  
  三个都是santa的抗体，一个BCl2，另外两个也是调亡的抗体，没做对照，样品是小鼠的，电泳图没照，wb图片没扫描呢(扫描仪坏了)，但我用了western marker，杂交正常。

• tianmei001 (2014-1-07 17:51:09)

  
  这是其中一个抗体的，九个样品，最右边是marker。

  
  78641767.snap.jpg

• qqq111 (2014-1-07 17:51:46)

  
  怎么条带看着这么像抗体啊。marker分子量？
  一抗是单抗还是多抗？
  二抗种类？

• tianmei001 (2014-1-07 17:52:05)

  
  这张片子一抗是多抗，还有一个是单抗也是这样，二抗是HRP标记的羊抗兔的igg。marker从上往下120 85 60 40 22kda。

• tianmei001 (2014-1-07 17:52:33)

  
  为什么说像抗体呢？

• vcve (2014-1-07 17:52:54)

  
  八成1抗没结合上，santa的抗体我实在不敢恭维，用过一次，效价很低，后来一律改用CST的了，从来没出过问题。个人觉得抗体上的钱省不得。

• qqq111 (2014-1-07 17:53:14)

  
  是条带和抗体的SDS-PAGE很像，包括距离和强弱。我一开始怀疑二抗和样品中的IgG有交叉，但根据你的分子量我的想法是错误的。

• tianmei001 (2014-1-07 17:53:33)

  
  bcl2的抗体我用过的，杂交别的样品是没问题的，但杂交这次的样品就现在这样。如果一抗美结合上又怎么会有条带呢？

• zhenxin (2014-1-07 17:53:55)

  杂带是很正常了。
  趋势如此一致说明内参也是这样了。
  并且胶可能跑的可能不太好

• tianmei001 (2014-1-07 17:54:21)

  胶应该没问题，现在不是杂带的问题，是三个抗体都是这样子，而且不是目的带，我现在怀疑样品的问题，希望前辈们给点建议阿