【求助】为什么做WB时DAB显色非常漂亮,但是发光法...


我现在在WB,我发现有的抗体用发光法很漂亮,但是有的抗体用发光法就是出来,但是用DAB显色又很漂亮,都是同一个二抗。原因何在?请问如何解决?

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最新回复

  • 小游abc (2014-1-14 16:58:52)

    谢谢!请高手回答,是否需要换二抗!
  • yychen (2014-1-14 16:59:10)


    我也遇见这样的情况,那位知道啊,我二抗都换了,上样达到150ug
  • 莲花白 (2014-1-14 16:59:35)

    QUOTE:

    原帖由 小游abc 于 2014-1-14 16:58 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')

    我现在在WB,我发现有的抗体用发光法很漂亮,但是有的抗体用发光法就是出来,但是用DAB显色又很漂亮,都是同一个二抗。原因何在?请问如何解决? ...
    你用的是不是同一种浓度,如果是的话建议把两个抗体的浓度全部稀释,抗体浓度高并不一定是好事,还有你确定你的发光法没有操作失误吗?还有就是要注意膜的正反情况,DAB问题不大,当时荧光的话就发不出来光的!
  • 小游abc (2014-1-14 17:00:20)


    我是DAB都能出来,并且很漂亮,但是ECL有时能出来,有时出不来,条带也不漂亮。
  • 小游abc (2014-1-14 17:00:39)

    请问用ECL法时,抗体浓度是降低还是升高?
  • orangecake (2014-1-14 17:01:10)

    QUOTE:

    原帖由 小游abc 于 2014-1-14 17:00 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
    请问用ECL法时,抗体浓度是降低还是升高?
    降低抗体浓度至少一倍以上