【求助】蛋白含量测定

最新回复

• hyuu (2014-1-19 10:36:32)

  
  我每次用考马斯亮蓝法出来也是曲线，没抛物线那么夸张，建议用0.995

• ritou1985 (2014-1-19 10:37:10)

  QUOTE:

  原帖由 eric930 于 2014-1-19 10:36 发表
  
  请教各位高手，小弟第一次做western blot 。蛋白含量我用考马斯亮蓝法测定，可是测了几次，标准蛋白曲线都是抛物线拟合的最好，R2在0.995左右，而直线的R2只有0.968左右。请问我该哪个？还是两个都不能用啊？ ...

  抛物线是什么意思？
  应该是比较直的直线吧

• eric930 (2014-1-19 10:38:05)

  
  呵呵，谢谢各位！！！理论上应该是直线，可我们拟合的确实是抛物线合适,我们该怎么办？

• vcve (2014-1-19 10:39:17)

  
  换种蛋白测定方法吧，之前我用考马测，标线也不好，现在改成lowry法了，标线线性很好的Smile

• xueyouzhang (2014-1-19 10:39:44)

  考马一定要现用现配

• qqq111 (2014-1-19 10:40:10)

  请教各位高手，小弟第一次做western blot 。蛋白含量我用考马斯亮蓝法测定，可是测了几次，标准蛋白曲线都是抛物线拟合的最好，R2在0.995左右，而直线的R2只有0.968左右。请问我该哪个？还是两个都不能用啊？
  
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  可以去对数后，做出直线，然后计算蛋白浓度。
  那样估计就可以达到0.99了。
  在数据处理过程中，偏差较大的数据就直接去掉，甚至一组数据。
  祝楼主顺利
  

• hyuu (2014-1-19 10:40:41)

  
  用BCA法就是很直的直线，试试吧！

• dmg (2014-1-19 10:41:16)

  
  建议使用BCA法，没有什么难的，当时所用的试剂都是我们自己配的