【求助】关于超滤管，能信任吗

最新回复

• hyuu (2014-1-19 13:12:19)

  这可以浓缩吗？3kd的膜，金属离子会被滤过的吧。。。

• 嗅嗅 (2014-1-19 13:12:36)

  嗯，我就是想通过超滤来去除蛋白质溶液中的游离金属离子，
  于是我做了这个没有蛋白质的试验，理论上应该金属离子都被滤过的，可是怎么还有残留呢。
  怎么样改善呢

• dog002 (2014-1-19 13:12:59)

  
  超滤管的作用似乎更倾向于浓缩，而不是过滤。
  其实超滤后的金属离子浓度已经下降到8.6ppm，说明滤过效果还不错，毕竟管里的溶液体积肯定是比先前小多了，金属离子的绝对量是少了。为了持续降低金属离子的浓度，可以添加水或者其他缓冲液，继续离心 超滤，但金属离子浓度肯定不会达到0的。
  如果仅仅是去除游离的金属离子,是否可以使用EDTA来处理？

• wawa (2014-1-19 13:13:25)

  QUOTE:

  原帖由 嗅嗅 于 2014-1-19 13:12 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  嗯，我就是想通过超滤来去除蛋白质溶液中的游离金属离子，
  于是我做了这个没有蛋白质的试验，理论上应该金属离子都被滤过的，可是怎么还有残留呢。
  怎么样改善呢 ...

  
  你错了，理论上管内金属离子的浓度应该还是10ppm。你所测定的8.6ppm是测定误差。3kd的膜对金属离子无截留作用，那么内管和外管的浓度就是一样的。当然如果你在用蛋白做实验时，浓缩后再加无金属离子的缓冲，多次后就可以降低金属离子的浓度。为什么不用透析？

• 嗅嗅 (2014-1-19 13:13:49)

  楼上你说得对，单纯的金属溶液，是不应该有浓度差别的。我的意思是管子里应该不剩下任何溶液才对。
  因为我想的蛋白质溶液中含有金属，一部分是与蛋白螯合的，一部分是游离金属离子，我想除去游离的金属离子。所以超滤之后剩下的金属离子我认为是螯合的。
  但是单纯的金属溶液，都是游离的金属，尚且不能去除，我要怎么进行螯合部分和游离部分的分离呢？

• 嗅嗅 (2014-1-19 13:14:10)

  透析需要的时间太长了，而且我不太清楚这个情况要选择什么样的透析液，总之不能用EDTA。也不想用PEG。

• 嗅嗅 (2014-1-19 13:14:26)

  QUOTE:

  原帖由 wawa 于 2014-1-19 13:13 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  
  你错了，理论上管内金属离子的浓度应该还是10ppm。你所测定的8.6ppm是测定误差。3kd的膜对金属离子无截留作用，那么内管和外管的浓度就是一样的。当然如果你在用蛋白做实验时，浓缩后再加无金属离子的缓冲，多次后就可以降 ...

  可以指点一下应该用什么解析外液吗？

• ALALA (2014-1-19 13:15:07)

  
  透析的话就用不加改金属离子的，目前你的蛋白所在的溶液作为透析液就可以啊。
  再说超滤，如panmo2006说的那样，要多次更换没有该金属离子的缓冲液进行超滤。也就是说每次超滤到最小体积之后，再加满不含该金属离子的缓冲液，超滤到最小体积，如此重复3-5次。其实也就是buffer exchange的过程吧。
  开始我还以为你说什么金属溶液。。。结果是含金属离子的蛋白溶液，呵呵

• 嗅嗅 (2014-1-19 13:15:30)

  p.s. 一楼我说的金属溶液不是蛋白溶液。