【求助】蛋白过柱后，浓度变小，电泳无法检测

最新回复

• 7437654 (2014-1-22 16:26:07)

  
  如果仅仅是要检测目的蛋白在哪里峰里的话可以考虑冷丙酮沉淀，但是样品如果盐浓度比较高的话也不太好，一起沉淀下来的盐会影响电泳，just try

• flower-201 (2014-1-22 16:26:37)

  
  样品量这么少最有效的方法是把样品冻干，复溶（冻干之前要先把盐透析掉，否则复溶后盐浓度太大）
  或者在不浓缩的情况下，增大上样量，选用更灵敏的染色方法（银染替换考染）；如果有抗体，也可以转膜，做WB。

• ending (2014-1-22 16:27:00)

  
  超滤浓缩啊.既可以除盐,还可以浓缩.

• xyw5 (2014-1-22 16:27:51)

  
  我的目的蛋白10ml，在过了Q sepharose FF后，每个峰的体积大概在8ml左右，但是用SDS-PAGE不能检测出来，请问除了透析浓缩有没有更好，更快的办法浓缩样品？谢谢！
  你可以用超滤管超滤浓缩，如果单为了跑电泳可以直接用TCA来沉淀目的蛋白，这样需要样品的体积也小一些。

• tie8 (2014-1-22 16:28:23)

  
  超滤浓缩或者有机沉淀蛋白后再跑电泳

• yes4 (2014-1-22 16:28:45)

  
  q-柱是能起到浓缩效应啊，你应该分管收集，不应该8ml都收集到一起

• bamboo16 (2014-1-22 16:33:48)

  可以多取一点蛋白，比如100微升，然后在开水中煮沸，不要盖Ep管盖子，这样水就会蒸发，起到浓缩的效果。

• vcve (2014-1-22 16:37:26)

  
  超滤和冷冻干燥都是很好的方法,同样也可以用聚乙二醇浓缩,把样品放在透析袋里然后将其放到聚乙二醇中,浓缩速度很快,效果也不错,而且比较经济.