【求助】SDS-PAGE 配胶不凝啊

最新回复

• zranqi_1 (2014-2-03 21:54:36)

  
  更换AP。
  好的AP，配的时候，当你加水时有吱吱响声，这证明AP正常。
  建议现用现配。

• applebook=213 (2014-2-03 21:55:07)

  
  (凝胶时间不对，或慢或快)
  通常胶在30MIN-1H内凝。如果凝的太慢，可能是TEMED，APS剂量不够或者失效。APS应该现配现用，TEMED不稳定，易被氧化成黄色。 如果凝的太快，可能是APS和TEMED用量过多，此时胶太硬易裂，电泳时易烧胶。

• HP007 (2014-2-03 21:55:24)

  
  主要的可能性是AP和TEMED，不过还有一个可能性是气温问题，温度低的话也是凝不起来的，冬天要放空调房凝

• cwcwcww (2014-2-03 21:55:46)

  
  AP或者TEMED坏了

• zhihui小新 (2014-2-03 21:56:06)

  
  1. 过硫酸铵极易吸水潮解，分解的过硫酸铵诱导丙烯酰胺凝聚的能力变差，因此配置后的原瓶要盖紧，必要时用parafilm封口，配好的10%过硫酸铵置于4℃保存，时间为2周。也可置于-20℃保存，时间可长达半年。
  2. 天冷的时候，胶就会凝的不好，影响底下的带的效果。你可以打开空调，或者把胶放暖气上或者用白炽灯烤烤。
  3. TEMED TEMED通过催化过硫酸铵形成自由基而加速丙烯酰胺的聚合。TEMED只能以游离碱的形式发挥作用，因此pH较低时聚合反应受到抑制。

• misswu61 (2014-2-03 21:56:26)

  
  AP出问题了！

• dmg (2014-2-03 21:56:44)

  
  嗯，谢谢各位前辈！
  我重新订AP和TEMED试试。

• caihong (2014-2-03 21:57:04)

  
  我觉得有可能是30%的丙烯酰胺有问题了，我们这边一次新来的实习生把丙烯酰胺配错了，就导致了总是不凝，只是呈现为胶状的。你可以查查配制记录，看是不是有问题。

• cwcwcww (2014-2-03 21:57:29)

  
  除了AP TEMED 温度之外会不会是配丙烯酰胺的时候 甲叉不行啊

• taoshengyijiu (2014-2-03 21:57:48)

  
  所有的东西都换新的，包括8.8和6.8的Tris盐酸。空调打开。肯定能凝。有的时候如果这些东西有不新鲜的，即使胶凝了，跑出来的效果也不会好。这个是血的教训啊。不能偷懒。