【求助】WB最后显影问题请教

最新回复

• guagua (2014-2-07 22:06:39)

  
  个人觉得第二张片更可靠点
  第一张片最后一条没出现的带在2、3均出现了，说明你第一张可能压片没压好，或者时间短没爆好
  第三张时间比较长，很容易造成条带均比较浓
  仅是个人观点，抛砖引玉呵呵

• 12xunmei (2014-2-07 22:07:02)

  什么叫做“同一张膜，孵育3min后，分别压了两张胶片”－－你是两张胶片一起压还是2次孵育再分别做压片？描述充分比较能让人理解准确。

• yayya (2014-2-07 22:38:08)

  QUOTE:

  原帖由 12xunmei 于 2014-2-7 22:07 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  什么叫做“同一张膜，孵育3min后，分别压了两张胶片”－－你是两张胶片一起压还是2次孵育再分别做压片？描述充分比较能让人理解准确。

  谢谢提醒，“同一张膜，孵育3min后，分别压了两张胶片”－－是两张胶片分2次孵育后再分别做压片，第一张胶片压好后再压第二张胶片。

• ztonyc (2014-2-07 22:39:18)

  楼主越解释越糊涂了，我理解是底物显色液孵育3min后，分别曝光3次，各式2，8，5min。如果是这种情况下，我认为图一，二，趋势基本一致，图一一条带，是因为显色时间短，灵敏度不够高，不足以曝出上面的条带；图二因为曝光时间长，原来信号比较弱的条带也暴了出来。图三，最右边的条带相对比较量，可能是由于HRP酶促反应的显色机制造成的，在这个时间段内这条带达到了亮度的最高峰。ECL由于酶促反应导致信号强度不太规律，定量不准的。如果LZ想要定量，建议用荧光显色。
  不知道LZ的目的是什么，是对上边的细条带感兴趣，还是对条带亮度感兴趣。

• yayya (2014-2-07 22:39:53)

  QUOTE:

  原帖由 ztonyc 于 2014-2-7 22:39 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  楼主越解释越糊涂了，我理解是底物显色液孵育3min后，分别曝光3次，各式2，8，5min。如果是这种情况下，我认为图一，二，趋势基本一致，图一一条带，是因为显色时间短，灵敏度不够高，不足以曝出上面的条带；图二因为曝光时间长，原来信号比较弱 ...

  
  是这种理解。我现在遇到的难题是：图一条带不完整，但一强一弱一强（结果比较可靠）；图2和图3尽管条带完整，但是趋势（差别）被因压片时间过长而掩盖了。因此，我现在不知哪一个是真实结果，其实我更加看重第一个结果，不知对否？？

• ztonyc (2014-2-07 22:41:09)

  
  如果看趋势的话，当然是看图一和图二了，图一和图二的趋势基本一致的，只是灵敏度不同而已。个人意见：上边的细带如果是lz需要的话，就选图二，反之，就选图一。

• chuntian1983 (2014-2-07 22:41:32)

  大家好！我是新手，想请教一下，显影时“用X光压片”是怎么回事？具体应该怎样操作？谢谢了！