【求助】请教蛋白结晶的温度

最新回复

• ha111 (2014-2-08 22:42:16)

  
  一般常用 20 度。
  然而蛋白质结晶目前貌似还没有什么普遍规律可循，跟别的因素一样，温度会对结晶过程产生影响，包括是否结晶，晶体形状，大小，质量，所以，结晶条件筛选时，温度也是变量之一。（常选 20 ，4 度，如果不过瘾，还可以选10，15或者其他的）
  一定要有严格的温控装置，否则将来的重复实验会有问题。
  冰箱 is not a wise choice ，马达的震动 会影响 晶核 的形成，极可能导致试验失败。

• chuntian1983 (2014-2-08 22:43:05)

  
  蛋白結晶還處于經驗性的階段,沒有明確的規律.
  Hampton Research 曾經做過統計﹐23度的結晶率最高, 其次好象是4度. 實驗室有條件﹐就多嘗試﹔沒條件﹐就跟別的實驗室合作﹐利用條件。

• fklo83 (2014-2-08 22:43:32)

  
  我们这边好像是16℃和4℃

• fklo83 (2014-2-08 22:43:52)

  QUOTE:

  原帖由 chuntian1983 于 2014-2-8 22:43 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  蛋白結晶還處于經驗性的階段,沒有明確的規律.
  Hampton Research 曾經做過統計﹐23度的結晶率最高, 其次好象是4度. 實驗室有條件﹐就多嘗試﹔沒條件﹐就跟別的實驗室合作﹐利用條件。 ...

  哦，我们老板的意思是先在自己实验室进行结晶条件筛选，得到晶体之后再跟别的实验室合作。
  控温要很严格吗，之前我看别人实验室就要么放冷室，要么就放室温，室温虽然是有中央空调控制，但我觉得温度不会非常恒定的。感觉试很多温度成本比较高的吧。肯定不可以就一个tray放4度几天，再移到室温几天，再移到另外个温度，而是每个温度都单独的tray吧？

• fklo83 (2014-2-08 22:44:10)

  QUOTE:

  原帖由 fklo83 于 2014-2-8 22:43 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  我们这边好像是16℃和4℃

  16度似乎可以用温箱去实现，那4度兄台怎么实现的，2楼的兄弟也说冰箱是不可取的，有马达。

• fklo83 (2014-2-08 22:44:31)

  QUOTE:

  原帖由 ha111 于 2014-2-8 22:42 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  一般常用 20 度。
  然而蛋白质结晶目前貌似还没有什么普遍规律可循，跟别的因素一样，温度会对结晶过程产生影响，包括是否结晶，晶体形状，大小，质量，所以，结晶条件筛选时，温度也是变量之一。（常选 20 ，4 度，如果不过瘾，还可以选10，15或 ...

  那你们4度是怎么实现的啊。冷室？ 是不是冷室应该是一个重点实验室的标准配备啊？

• dreaming (2014-2-08 22:44:57)

  
  需要4度的话，跟20度一样，我们实验室使用结晶专用的恒温控制柜。如果没有，冷室也行，如果实在没辙，那就冰箱吧，总比不做好。
  如果是做蛋白质工作的实验室，我想冷室应该是必不可少。

• fklo83 (2014-2-08 22:45:23)

  请问楼上是在哪的实验室啊，你们做哪方面是不是蛮厉害？
  再有你说的那个恒温箱是哪产的啊，具体型号之类的信息能否提供一下，谢谢了
  我们实验室之前做蛋白不多，所以没有冷室，很郁闷。。。

• chuntian1983 (2014-2-08 22:45:46)

  
  三洋（Sanyo） cool incubator MIR 253.
  没有4 度也不用太郁闷，谁能保证4度才能结出晶体？首先筛选一下 20 度吧。

• fklo83 (2014-2-08 22:46:06)

  
  我在想20度情况下，蛋白会不会很容易就降解呢。