【求助】SDS-PAGE跑得很分散，找不到原因

最新回复

• mickeylin (2014-2-13 11:14:23)

  
  是不是tris缓冲液出问题了，测测pH值看看

• fsdd817 (2014-2-13 11:14:42)

  
  很分散是指没有压缩好吗？

• memory (2014-2-13 11:15:08)

  你跑的是多大浓度的胶？还是Tricine-SDS-PAGE ?还有你的目的蛋白是多大，跑的时候电压是多大？说清楚，大家才可以给你帮忙！

• zzzz (2014-2-13 11:15:26)

  
  我跑蛋白时也发生了这种现象，tris缓冲液没有问题，浓缩效果也不错，就是分离胶跑时条带宽，分散，我的分子量位16.4kda，电压是70，140，请给予帮助！

• is2011 (2014-2-13 11:15:52)

  QUOTE:

  原帖由 zzzz 于 2014-2-13 11:15 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  我跑蛋白时也发生了这种现象，tris缓冲液没有问题，浓缩效果也不错，就是分离胶跑时条带宽，分散，我的分子量位16.4kda，电压是70，140，请给予帮助！ ...

  在浓缩胶中的压的怎么样？我一般都是30v跑的浓缩胶，100v跑的分离胶，我的胶浓度是12.5%，你跑多大浓度的胶？如果胶浓度太高，也会出现条带再分离胶中很宽的现象的。

• junhun (2014-2-13 11:16:34)

  QUOTE:

  原帖由 is2011 于 2014-2-13 11:15 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  
  在浓缩胶中的压的怎么样？我一般都是30v跑的浓缩胶，100v跑的分离胶，我的胶浓度是12.5%，你跑多大浓度的胶？如果胶浓度太高，也会出现条带再分离胶中很宽的现象的。 ...

  你好！我的胶是glysine-SDS-PAGE胶，目的蛋白14KD，在17KD以上的蛋白条带很好，条带之间非常清楚，可是17KD以下蛋白的跑不出来或者很模糊，为什么呢？积层胶75v,分离胶100V。并且，全部体系可以做出43kd的内参啊。急求原因啊。有什么特殊注意的嘛？

• is2011 (2014-2-13 11:17:11)

  QUOTE:

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  你好！我的胶是glysine-SDS-PAGE胶，目的蛋白14KD，在17KD以上的蛋白条带很好，条带之间非常清楚，可是17KD以下蛋白的跑不出来或者很模糊，为什么呢？积层胶75v,分离胶100V。并且，全部体系可以做出43kd的内参啊。急求原因啊。有什 ...

  你的胶浓度是多大的？分离胶浓度是不是太低了？

• misswu61 (2014-2-13 11:17:56)

  我也认为是否会是分离胶的浓度低了点。可否调到15%试试看效果。
  附一下资料希望对大家有帮助：

  
  97427279.snap.jpg

• huifeng0516 (2014-2-13 11:22:25)

  
  分散一般就是两个问题一个是你的目标蛋白分子量较小，另一个就是胶的浓度有点低吧。

• DDD (2014-2-13 14:27:26)

  
  小的蛋白，确实不够清楚。。。