【求助】弱弱地问一个关于利用层析法分离提纯蛋白质...

最新回复

• quiqui008 (2014-2-20 20:19:43)

  一套层析系统很贵的，你还是打消自己准备的念头吧。

• join (2014-2-20 20:20:12)

  
  填料如果是小量的，应该可以问填料公司要的吧？
  在实验室里面做目标蛋白的分离时所用的柱子并不贵，我认为比较麻烦的是分离过程中蛋白的检测包括蛋白的性质、纯度、活性等测定，需要的仪器和测试费用都比较昂贵。

• bluelake (2014-2-20 20:21:00)

  
  简单的可用蠕动泵+紫外检测仪就够用了，没有的话就用重力柱吧，可以尝试，复杂的就需要akta或者biorad啦

• PPT (2014-2-20 20:22:13)

  
  对层析来说贵有贵的做法，没有足够的经济条件同样可以做。国产的柱子都不贵，只要不上机器，常压下都是没有问题的。可以买个蠕动泵，紫外检测和收集根据条件配置。

• zwsyrt (2014-2-20 20:22:50)

  你在哪里
  我们这里什么都很全
  建议找个附近的学校或单位借用设备 假如需要适当费用
  去找boss 记着带实验方案
  纯化个蛋白不够毕业吧

• ALALA (2014-2-20 20:24:37)

  
  还是可以做的，事在人为嘛，要充分发扬DIY精神哈
  树脂很贵，自己买估计不是很容易，而且你要四种，最好找同学借用一下吧，其实只要一点点就够了。这东西可以反复用的，洗一下再还人家呗。
  柱子嘛，普通的玻璃柱，不加adaptor的只要几十块吧，如果实验室实在是穷，可以用注射器自己装，我现在用的就是，效果跟买的差不多。
  泵要千把块吧，老板不给买就靠天吃饭吧，用重力提供动力，下面用夹子控制流速，效果也不错。
  紫外检测器没有的话就别用了，分部收集后用分光光度计挨个测吧，这个总是有的吧，测完了自己绘图。
  分部收集器没有的话就用手工收吧，旁边摆一个计时器，定时收集，还不会漏，比机器收的还好呢。
  还有什么没有，检测嘛，最常用的就是PAGE，没有的话到别实验室蹭吧。让同学给带个样也行。
  浓度测定嘛，lowry做不起来就考马，考马不行咱不是还有紫外嘛，也可以初步定量的啊。
  事实上，我们实验室刚开始没有AKTA的时候就是这么搞的，做的也还行。但话说回来，如果实验室没有基础，白手起家，兄弟要走的路可就长了啊。