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【求助】western显影问题

字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2014-2-20 20:47    作者: pou    来源: 分析测试百科网

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【求助】western显影问题

最近做western，显影时，加上显色液以后，关灯，整张膜全是荧光，显影出来片子是全黑的，哎，很郁闷，不知道这是咋回事～～

[ 本帖最后由 pou 于 2014-2-20 20:52 编辑 ]
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  • 白白的 (2014-2-20 20:47:45)


    呵呵,LZ肯定是新手,因为这些问题大家刚开始做的时候应该都遇到过.我当时做的主要原因是A,B液的稀释比例太高,建议再多稀释一下,比如原来是20倍稀释的现在变成40倍,而且整张膜全黑的原因可能是你A,B液没有吸干净,溢出很多的话片子就黑了.这个是我个人的看法,希望大家也谈谈你们是怎么想的,怎么改善的.

  • #问号# (2014-2-20 20:48:13)

    还有可能是你的二抗没洗好，所以背景会很高。有目的条带吗？

  • xingyi08 (2014-2-20 20:48:31)


    显影液之类的液体有没问题？

  • jingling845 (2014-2-20 20:48:54)


    不用看了.一抗问题!
    换一抗吧

  • bluelake (2014-2-20 20:49:19)


    可能一抗浓度太高。

  • 二子 (2014-2-20 20:49:43)


    存在一下两者可能：
    1。 你的显影液没有吸干净，导致这个问题。这个可能性比较大。
    2. 你的二抗没有洗好。

  • mercedes (2014-2-20 20:50:02)


    三种可能之一
    1、一抗的问题，换吧
    2、二抗漂洗漂洗不彻底
    3、显影液比例反了

  • xueyouzhang (2014-2-20 20:50:21)


    除了上面提到的原因的话，封闭也有可能会影响背景的~！可以延长封闭的时间

  • sunnyB (2014-2-20 20:50:40)


    哈哈,我也碰到过同样的问题,有可能是一抗孵育时间过长,或者是二抗浓度太高,没有漂洗干净,AB液没有吸干净也有可能,把二抗浓度降低一点试试吧

  • sunnyB (2014-2-20 20:51:15)


    补充一下,其实荧光太强也不是不能曝片,你压片只压一秒钟立即显影,估计条带还是可以出来的
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