【求助】包涵体洗涤时可能有核酸该如何去除？

字体: 小中大 | 打印发表于: 2014-3-01 11:02 作者: 8黑眼圈8 来源: 分析测试百科网

我破菌后收集包涵体，但是在洗涤的过程中发现有黏黏的东西，怀疑可能核酸未能超声完全，用8M尿素溶解包涵体，离心取上清准备复性，结果上清也有点黏黏的，这样有什么影响么？该如何挽救呢？

喵咪 (2014-3-01 11:02:54)

Wash IB with DNAase 1 or use column, for instance, cation exchange column (SP etc al) to separate
8黑眼圈8 (2014-3-01 11:03:14)

谢谢楼上的指点，那在蛋白样品里加DNAase I 会对样品有影响么？有的话要如何去除呢？
popo520 (2014-3-01 11:03:32)

我做包涵体洗涤和变性的过程中也发现有黏黏的东西，但是好像并不是核酸
8黑眼圈8 (2014-3-01 11:03:56)

谢谢楼上的指点，那在蛋白样品里加DNAase I 会对样品有影响么？有的话要如何去除呢？
DNAase I would not affect your protein, it is DNA enzyme.
kuaizige (2014-3-01 11:04:16)

煮，加少量的3XSDS
喵咪 (2014-3-01 11:04:34)

煮，加少量的3XSDS
boil protein will be pretty risky to chang your protein, also, after SDS treat, it is very tough to separate SDS iwth protein
66小飞侠 (2014-3-01 11:04:55)

加DNase I就可以了。对蛋白样品不会有影响的。你看看分子克隆上有的。1250多页。这两天正在做。。。结果把离心机用坏了。。。郁闷呢。
shenkunjie (2014-3-01 11:05:22)

先用低浓度的尿素洗涤,减少核酸.
wmp1234 (2014-3-01 11:05:47)

我也遇到过这种情况,一般用STE、TritonX-100和低浓度尿素多洗涤几次就可以减轻这种现象。