【求助】SDS-PAGE电流为零？？

最新回复

• fei1226com (2014-3-01 17:19:18)

  没有碰到过类似问题，跑胶我一般都用80~100V，3~4小时就够了，你需要的蛋白质分子量一定很大吧，如果分子量不大没有必要跑这么快啊

• am10 (2014-3-01 17:19:39)

  
  “跑SDS-PAGE电泳时用的电压是120v，电流20mA ，跑了8个小时才跑了一半”说明电泳液在漏。“把电压调到150v，电流调到30mA，没有想到电泳的电流竟然变为 0 mA ”电泳液漏得低于薄玻片的位置，内槽与外槽无法形成回路。电流为0。
  解决办法：重新固定内槽。电泳前，先不急于上样，把电泳液加满内槽，等10min，看液面是否下降。

• lixi559 (2014-3-01 17:19:57)

  
  楼上分析的很全面，我也出现过这种情况，由于我们的玻板缺了一角造成电泳液渗漏，所以内槽的液面低于加样孔，电流就无法形成。后来亡羊补牢，把那个缺角堵上才顺利地跑完了电泳。假如120V，应该最多跑4h就完了。
  另外补充一下，假如刚开始电流为0，原因就很可能是胶条没有取掉，因为这些错误曾经都犯过，感同身受多说了几句。祝好运！

• 花想容 (2014-3-01 17:20:23)

  楼上解决办法：重新固定内槽。电泳前，先不急于上样，把电泳液加满内槽，等10min，看液面是否下降。
  我再试试哈，谢谢你！

• 花想容 (2014-3-01 17:20:40)

  楼上分析的很全面，我也出现过这种情况，由于我们的玻板缺了一角造成电泳液渗漏，所以内槽的液面低于加样孔，电流就无法形成。后来亡羊补牢，把那个缺角堵上才顺利地跑完了电泳。假如120V，应该最多跑4h就完了。
  另外补充一下，假如刚开始电流为0，原因就很可能是胶条没有取掉，因为这些错误曾经都犯过，感同身受多说了几句。祝好运！
  
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  我也不知道为什么跑了8个小时才跑到一半啊，玻璃板要用琼脂来封，里面的胶条怎么取啊？难道是不同的电泳槽？问题有点多呀，谢谢你的帮助！

• fei1226com (2014-3-01 17:21:01)

  
  胶条是浓缩胶聚合后大约一个小时才取掉，沿着四周轻轻去掉，不要破坏胶边缘的整齐度，然后重新固定。
  我用的北京六一迷你型电泳槽，你的问题应该不是胶条的原因，因为你开始是有电流的，所以还是电泳液渗漏的问题，按照gunzi的建议做吧，应该没问题了！

• 花想容 (2014-3-01 17:21:26)

  QUOTE:

  原帖由 fei1226com 于 2014-3-1 17:21 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  胶条是浓缩胶聚合后大约一个小时才取掉，沿着四周轻轻去掉，不要破坏胶边缘的整齐度，然后重新固定。
  我用的北京六一迷你型电泳槽，你的问题应该不是胶条的原因，因为你开始是有电流的，所以还是电泳液渗漏的问题，按照gunzi的建 ...

  北京六一迷你型电泳槽，上学期用过，也没有取胶条，用18mA的电流，跑4个多小时。以前有个师姐做也不取胶条的，呵呵........

• summerxx (2014-3-01 17:21:55)

  
  是不是短路了？