【求助】请问前辈我的TBST还能用吗？

最新回复

• is2011 (2014-3-10 17:17:02)

  建议不要用了，不好说有什么影响，至少离子浓度肯定不准了，如果试验要求比较高肯定不行了
  还是重配吧，别因为一个试剂，后面的试验全都白做不是
  另外配方最好再查查，你的配方有文献依据吗？

• xue258 (2014-3-10 17:17:21)

  
  建议重新配。
  不明白为何要配10*的，直接配1*的 不行吗？用的又不是很多。

• douding66 (2014-3-10 17:17:39)

  
  谢谢两位，我的配方是毕业师姐留下的，她也没说这么高浓度有什么特别作用。那我就重配了，按其他实验室的配方。恩，就我一个人做，就听楼上的建议，配1*的了，呵呵

• 云端ing (2014-3-10 17:18:01)

  
  建议楼主还是配10x的吧。我的经历是洗膜的用量、次数和时间如果少的话背景挺高的，不干净。我洗膜加的TBST的量都挺多的，洗了6、7次，所以TBST用量是挺多的。我们实验室一配就是配2L的10 x TBS，三个课题组一起用，也用的挺快的。祝楼主实验顺利成功。

• yonger (2014-3-10 17:18:22)

  
  就买武汉BOSTER的TBS啊,一包才8块,可以配制2升,然后自己配20%Tween-20就可以了,每次现用现加
  你这样太浪费时间了,省了钱,没省事

• NBA (2014-3-10 17:25:19)

  TBST缓冲液 的配制方法：
  1×TBST 1L
  Tris base 2.422g (MW121.4)
  Nacl 8.775g
  Tween20 0.5ml
  加蒸馏水至1升，最好现用现配。
  因为TBST的用量比较大，所以建议配成5×或10×的。如果每次都配1×的，那劳动量是相当的大，很麻烦的。

• yjf1026 (2014-3-10 17:25:38)

  
  我是配成10×tbs贮存液，临用时配成tbst

• tie8 (2014-3-10 17:28:17)

  溶液稀释10倍后，pH会向7漂移1。所以调pH应该在1倍溶液状态下。建议TBST最好还是配1倍的为好。

• douding66 (2014-3-10 17:29:01)

  我们的tween-20的终浓度是0.1%，即1L的TBS加1ml，每次10X稀释成1X的时候加。

• douding66 (2014-3-10 17:29:24)

  配成10x的方便，PH值就每次稀释后调一下吧，这样省事，呵呵。

• duoduo (2014-3-10 17:29:50)

  哈，这就要看你的判断了。可能每个人说的都对。
  PH值当然是配成1×的时候调节，怎么可能配成10×的时候调节PH值呢。
  其实没什么矛盾的，如果你不怕麻烦，就配1×的，如果怕麻烦就配10×的。
  你说你的tween-20的终浓度是0.1%，这个浓度是可以调节的，我们的都没错。
  tween-20为什么要稀释成1×的时候加呢？我们都是配成10×的时候加。不知到你们的用量怎么样，我们的用量是很大的，所以即使是10×的也用不了多长时间。

• douding66 (2014-3-10 17:30:19)

  当时我也奇怪tween-20为什么要后加，问了师姐，也没说出所以然来，但都是这么做的。我以为早加了会失效的呢。
  我的用量相对不多，因为实验室目前就我一人做western，tween-20就是用来配封闭液，稀释一抗二抗，还有就是洗膜。
  谢谢！