【求助】为什么Marker跑得非常开?

最新回复

• dmg (2014-3-10 20:54:49)

  就是Marker条带一直往下跑，不像正常的那样停在该停的位置而是向下移位并且距离拉的很大。而下面的条带还没跑出来。

• HP007 (2014-3-10 20:55:10)

  楼主的中文、、、、、我看不太懂
  你的意思好像是Marker不分开。别人有没有用这个Marker，

• xiaoxiaoniao (2014-3-10 20:55:37)

  
  下面的条带是不是指分子量最小的？
  跑没了吧？

• jiushikeshui371 (2014-3-10 20:56:35)

  
  胶的浓度没问题吧？电压呢？

• dmg (2014-3-10 20:56:56)

  
  大家好，我还没说清楚。我开始用的是10％的分离胶和4%压缩胶，marker是MBI公司的，原来跑得非常漂亮，中间停了几天又开始作，结果是发现胶凝的慢，差不多2个小时才好了，然后跑胶发现marker只出现4条带（应该是6条的），只出现分子量大的几条，后面两条分不开，且上面最大分子量那条一直向下迁移到分离胶的1/2处，电压是先60V后100V。我考虑可能是胶的问题重新配胶，AP、缓冲液都是新配的结果还是不行。后又换了12％的分离胶和5％的压缩胶，电压80V一直跑结果照旧，郁闷了4天了，请问各位大侠到底是什么原因，多谢！！

• dmg (2014-3-10 20:57:17)

  
  最郁闷的就是大分子量的条带一直向下迁移，导致所有条带都向下迁移，向各位大侠求救，急！

• ffaa (2014-3-10 20:57:37)

  
  兄弟你应该是小分子的跑没了，还有聚丙正常吗

• dmg (2014-3-10 20:57:56)

  聚丙是新的进口的，就算小分子的跑没了，可大分子的为什么向下迁移呢？

• njkph (2014-3-10 20:58:14)

  那当然了，是电泳啊，当然分子要迁移啊，你减少一下电泳时间试试，还有你的胶的浓度再调一次跑跑看，浓度大一点

• tie8 (2014-3-10 20:58:37)

  
  胶凝慢一般是AP和聚丙出了问题。如果这些没有问题的话，可以适当多加一些AP或升高温度。不过我觉得是你的AB浓度配错了，或者跑的时间太长了。

• dmg (2014-3-10 20:59:04)

  
  应该不是AP问题，我用别人新配的也不行啊。用别人做的很好的30％的胶也不行，前几天随便做一下很好的怎么会变成这样，想跳楼呀！！

• cwcwcww (2014-3-10 20:59:58)

  
  你的聚丙烯酰胺是新买的？和几天前用的不一样是吗？我遇到过这种情况，换过聚丙烯酰胺后就不行了，也说是进口的，但是经销商分装的，原因是纯度不够，聚合后的胶孔径达不到原来正常的水平，我怀疑你的情况也是这样！你可以拿别人的聚丙烯酰胺储液和你的其他试剂配一次试试！祝你好运！

• dmg (2014-3-10 21:00:17)

  
  多谢楼上。聚丙烯酰胺是新买的，可我用别人用的很好的也配过照样凝的很慢，真是见鬼了。

• uuooii (2014-3-10 21:01:51)

  
  你用别人的胶配的跑过吗？孔径还是有问题吗？如果只是凝的慢没太大问题，如果也是有问题，有可能是缓冲液的pH或者是TEMED有问题了，APS形成自由基需要中性或碱性环境，测缓冲液的pH看看是否正确。TEMED一般很少出现问题，但如果盖子没盖紧的话它有很强的吸湿性，有水掺入的话一般六个月左右就不行了！再检查检查吧，祝你好运！

• dmg (2014-3-10 21:02:27)

  
  多谢各位建议，昨天终于发现原因，确实是聚丙烯酰胺的问题，换了新的sigma公司原装的就好了，一切恢复正常，非常感谢各位！