【求助】请教电泳问题

最新回复

• hold住 (2014-3-12 14:57:58)

  
  画面的左侧漏液，电泳液或者分离胶的PH不对，尤其是分离胶，我怀疑你根本就用的是堆积胶的tris。
  电泳时，温度也过高。因为渗液，导致内外槽有些微短路，所以温度过高。（如果你是按照以前常用的电压的话；要么就是为了加速电泳，人为升高了电压）

• NBA (2014-3-12 14:58:20)

  
  【1】见别人出现过这种情况，有时候，开始是不平，最后跑完了电泳又平了，挺奇怪的。有时候就跑成上面的图那样，哈。拐弯了。
  【2】解决问题的方法还是特别的简单。哈。把玻璃板洗干净，洗的干干净净。
  【3】我以前也是这样告诉我同学的，对方说，我是用洗洁精洗的，怎么会不干净呢。其实洗玻璃不是用什么洗的问题。关键是洗的是不是干净。洗完了，用水一冲，上面没有痕迹，没有水滴，都是光滑的，这就干净了。
  【4】建议用流水洗。不建议在容器里放一些水，玻璃放在里面洗，这样不容易洗干净。

• ztonyc (2014-3-12 15:06:21)

  
  谢谢
  我会在多做几次找找原因
  最近不知道什么原因
  配的胶就一直不凝固
  把所有的都换了一遍还是不行
  怀疑是过硫酸铵失效了
  一会我看看胶如果还不凝就换另一瓶过硫酸铵试试吧
  

• ztonyc (2014-3-12 15:06:38)

  【1】见别人出现过这种情况，有时候，开始是不平，最后跑完了电泳又平了，挺奇怪的。有时候就跑成上面的图那样，哈。拐弯了。
  【2】解决问题的方法还是特别的简单。哈。把玻璃板洗干净，洗的干干净净。
  【3】我以前也是这样告诉我同学的，对方说，我是用洗洁精洗的，怎么会不干净呢。其实洗玻璃不是用什么洗的问题。关键是洗的是不是干净。洗完了，用水一冲，上面没有痕迹，没有水滴，都是光滑的，这就干净了。
  【4】建议用流水洗。不建议在容器里放一些水，玻璃放在里面洗，这样不容易洗干净。
  ......
  
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  觉得我的板洗得还可以啊？！
  难道要求洗得非常干净才可以？

• NBA (2014-3-12 15:07:19)

  谢谢
  我会在多做几次找找原因
  最近不知道什么原因
  配的胶就一直不凝固
  把所有的都换了一遍还是不行
  怀疑是过硫酸铵失效了
  一会我看看胶如果还不凝就换另一瓶过硫酸铵试试吧
  ......
  
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  加大AP和TEMED的用量试一下。

• hold住 (2014-3-12 15:08:29)

  
  呵呵，我相信你的胶板洗干净了，因为那根本不是原因。胶板没洗干净，不会出现那么严重的弯曲。判断胶板洗没洗干净，用手摸一下有没有疙疙瘩瘩。如果你想要高质量的data，洗干净玻板是很重要。最好用洗洁精，洗衣粉、肥皂都不好用。
  你自己说对了APS失效了，10%APS一般保质期才一个月左右。
  调Tris PH时，最好第二天重新测一下。
  你这种电泳装置，最易漏液。其实你倒好电泳液之后，不要急着电泳，先静置10数分钟，观察内侧的电泳液会不会降低（所以开始时你内侧液体最好full to brim，这样少一点很明显），否则那边漏液，条带往哪边倾斜。

• ztonyc (2014-3-12 15:09:15)

  
  谢谢
  最近真是为个电泳愁死了

• ztonyc (2014-3-12 15:10:36)

  
  硫酸铵和TEMED换了还是不好用啊
  难道仪器的问题？？
  在检查一下仪器吧
  怎么突然变的这么麻烦了呢？！

• ztonyc (2014-3-12 15:11:00)

  
  今天电泳又失败了
  电泳所需的的都换过来，包括重配液体和新的电泳槽，但是电泳还是不行
  我现在怀疑不是电泳槽有问题就是我的某一药品失效
  目前我想到的就是在找个电泳槽和把电泳所需的试剂换一遍
  很麻烦的
  唉
  心疼MARKER和时间啊
  再跑不加MARKER了。。。。。
  ：（

• 49888 (2014-3-12 15:16:55)

  
  大哥，你的APS有问题，绝对的！