【求助】酶标结果OD值阴性比阳性高会是什么原因？

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• 箭头儿 (2014-3-23 23:05:01)

  QUOTE:

  原帖由 mickeylin 于 2014-3-23 23:04 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  我做重组蛋白的诊断价值研究，蛋白样品过柱收集后（NI柱）进行酶标实验。结果总是不理想。主要问题是阴性不阴。阳性是显色的。
  请问各位大侠，除了蛋白纯度不高外，还有什么原因能引起这个结果。操作应该没问题的。先谢谢了 ...

  把试验步骤列出来把，
  你说的太简单的，太多可能性了。

• mickeylin (2014-3-23 23:05:49)

  ni柱 抗原蛋白收集后，进行SDS-page，检测结果纯度及浓度还可以，然后直接进行酶标（蛋白样品还有洗脱液里的米锉）
  37度包板3小时，洗涤三次后加人阴阳血清，每孔100微升，孵育35分钟；洗涤三次，加辣根酶标记的鼠抗人二抗，孵育35分钟；洗涤三次，加底物（ot）反应，结果显示是阴阳对掉，重复好几次了，操作应该没有什么问题。
  酶会有关系吗？

• 箭头儿 (2014-3-23 23:06:12)

  
  对照啊，对照，为什么总有人忘记作对照？
  对照一：阴性抗原 对 人阴阳血清
  对照二：阳性抗原 对 人阴阳血清

• lagua123 (2014-3-23 23:06:33)

  
  你测的是抗体吧？？

• bananapeople (2014-3-23 23:06:51)

  
  应该是筛表面抗原，作酶标诊断试剂盒的