【求助】17KD蛋白电泳和转膜条件?

最新回复

• langlang (2014-3-27 20:50:32)

  
  电泳条件：浓缩胶电压为40V较好，到分离胶可用60V。电泳至溴酚兰刚跑出即可终止电泳。也可以在大点电压，只要Marker显示条带不歪就行。
  转膜条件：我用的国产六一的，100mA，0.5h，效果还可以，可以试试。
  祝你实验顺利！

• avi317 (2014-3-27 20:51:18)

  
  谢谢你！我明天就试试．１２％的胶还是１５％的胶好呢？请多指教！

• tangxin_80 (2014-3-27 20:51:43)

  
  SDS-PAGE分离胶浓度 最佳分离范围
  12%胶 12-60kD
  15%胶 10-40kD
  故根据你的内参来决定，只要能跑开就可以。

• 49888 (2014-3-27 20:52:33)

  你说的100mA 0.5hr 是说半干转膜还是湿转？

• ritou1985 (2014-3-27 20:53:01)

  我用Bio-Rad半干转，5mA/cm2半小时至40分钟，可行

• kuaizige (2014-3-27 20:53:24)

  
  您好，我得蛋白也是170多得，希望我用两个月摸索出来的曙光对您有点用
  我用的是6％的分离胶5％的浓缩胶，并且跑蛋白的用的是90V 1.5H左右跑过浓缩胶后换成120V然后跑到底，蛋白分子量稍大用湿转较好，并且内参和目的蛋白最好分开跑

• kuaizige (2014-3-27 20:54:38)

  
  不好意思，我看错了，你的只有17KD,抱歉

• avi317 (2014-3-27 20:55:34)

  你说的100mA 0.5hr 是说半干转膜还是湿转？ 我只能用湿转,什么条件最合适?