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【求助】蛋白跑不出来是怎么回事啊？
【求助】蛋白跑不出来是怎么回事啊？
为什么我的蛋白跑不出来啊！我用的是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳跑200kb的蛋白质。但是跑下来用考马斯亮蓝染，胶板上什么都没有啊！大家有没有遇见过这种情况阿？ 而且溴酚兰能看到跑下去了，但是蛋白好像没有！
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字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2014-3-27 22:47 作者: skytree 来源: 分析测试百科网
最新回复
jujuba (2014-3-27 22:48:00)
200kd呀。太大了吧。你用%的胶呀。
skytree (2014-3-27 22:48:20)
vivian4123 (2014-3-27 22:48:42)
skytree (2014-3-27 22:49:02)
用了MARKER，但是连MARKER 也没跑出来。
flower-201 (2014-3-27 22:49:19)
skytree (2014-3-27 22:49:39)
分离胶浓度太大?应该不会吧,文献上别的人也是用的这个浓度啊,现在都快郁闷死我了.
greenbee (2014-3-27 22:49:54)
我俩的工作很有相似之处，我也在用SDS-PAGE跑220kd的蛋白，室温下跑的条带还可以，只是有些降解的迹象，在4度条件下跑的就没有条带，是不是因为SDS析出来了
greenbee (2014-3-27 22:50:15)
应该可以的啊,你可尝试多加点DTT,不知您煮样没,我跑250的很好啊,还用的比你高的分离胶呵呵
greenbee (2014-3-27 22:50:32)
还有可能就是您处理样品和marker时没处理好,都形成大的聚合物,您看看是不是在您的浓缩胶和分离胶分界线那有蛋白,跑不进分离胶
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