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【求助】为啥我电泳跑出来的蛋白带是空心的/
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SOS!SOS!!
我跑非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，跑出来的蛋白带是空心的，求高手解疑！！1
0.7mm的胶，我原来上样上18ul，后来看有人分析是上样量过多，我就试了试上样10ul，问题依然没有解决！实在是搞不定了，所以来求助于大家，希望能够有救。
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字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2014-3-29 14:24 作者: dotaaa 来源: 分析测试百科网
最新回复
dotaaa (2014-3-29 14:25:15)
我样品中的蛋白浓度也不大，是0.6mg/mL,我用了7ul加3ul loading buffer，共10ul上样
zhenxin (2014-3-29 14:25:46)
怎么上样量只有4.2ug呵？太少了吧？
我一般喜欢上50ug以上阿。
wmp1234 (2014-3-29 14:26:05)
没有分浓缩胶和分离胶吗？
dotaaa (2014-3-29 14:26:29)
是非变性胶，所以没有浓缩胶，只有分离胶
而且原溶液比较稀，还只有几十微升，所以只能上这么多了
有没有办法解决啊？
dotaaa (2014-3-29 14:26:47)
可是这跟空心带与否有关系吗？
remonte (2014-3-29 14:27:01)
这可能和蛋白性质有关，你是不是用银染色？
is2011 (2014-3-29 14:27:23)
非变性胶电泳是不是比SDS变性胶更容易降解？你的蛋白里有没有加蛋白酶抑制剂？或者经过了反复冻融？或者上样的体系里甘油含量太高？
fei1226com (2014-3-29 14:27:49)
dotaaa (2014-3-29 14:28:38)
考马斯亮兰染色
这张图上样上了18ul，有点多，可是我又做了一次，上样10ul，还是空心带
上样体系里甘油确实很多，6*的上样缓冲液让我当2*的使了，可是我当2*的使时还是空心带，55
dotaaa (2014-3-29 14:29:03)
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